ਮਰੀਜ਼ ਦੇ ਸੀਰਮ ਦੇ ਉੱਚ-ਰੈਜ਼ੋਲੂਸ਼ਨ ਪੁੰਜ ਸਪੈਕਟ੍ਰੋਮੈਟ੍ਰਿਕ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੇ ਹੋਏ ਉੱਚ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾ ਦੇ ਨਾਲ ਸੁਭਾਵਕ ਅਤੇ ਘਾਤਕ ਪਲਮਨਰੀ ਨੋਡਿਊਲ ਨੂੰ ਵੱਖ ਕਰਨ ਵਾਲੇ ਮੈਟਾਬੋਲੋਮਿਕਸ।

ਕੰਪਿਊਟਿਡ ਟੋਮੋਗ੍ਰਾਫੀ (CT) ਦੁਆਰਾ ਪਛਾਣੇ ਗਏ ਪਲਮਨਰੀ ਨੋਡਿਊਲਜ਼ ਦੀ ਵਿਭਿੰਨ ਨਿਦਾਨ ਕਲੀਨਿਕਲ ਅਭਿਆਸ ਵਿੱਚ ਇੱਕ ਚੁਣੌਤੀ ਬਣੀ ਹੋਈ ਹੈ।ਇੱਥੇ, ਅਸੀਂ 480 ਸੀਰਮ ਨਮੂਨਿਆਂ ਦੇ ਗਲੋਬਲ ਮੈਟਾਬੋਲੋਮ ਨੂੰ ਦਰਸਾਉਂਦੇ ਹਾਂ, ਜਿਸ ਵਿੱਚ ਸਿਹਤਮੰਦ ਨਿਯੰਤਰਣ, ਸੁਭਾਵਕ ਫੇਫੜੇ ਦੇ ਨੋਡਿਊਲ, ਅਤੇ ਪੜਾਅ I ਫੇਫੜਿਆਂ ਦੇ ਐਡੀਨੋਕਾਰਸੀਨੋਮਾ ਸ਼ਾਮਲ ਹਨ।ਐਡੀਨੋਕਾਰਸੀਨੋਮਾ ਵਿਲੱਖਣ ਪਾਚਕ ਪ੍ਰੋਫਾਈਲਾਂ ਨੂੰ ਪ੍ਰਦਰਸ਼ਿਤ ਕਰਦੇ ਹਨ, ਜਦੋਂ ਕਿ ਸੁਭਾਵਕ ਨੋਡਿਊਲ ਅਤੇ ਸਿਹਤਮੰਦ ਵਿਅਕਤੀਆਂ ਵਿੱਚ ਪਾਚਕ ਪ੍ਰੋਫਾਈਲਾਂ ਵਿੱਚ ਉੱਚ ਸਮਾਨਤਾ ਹੁੰਦੀ ਹੈ।ਖੋਜ ਸਮੂਹ (n = 306) ਵਿੱਚ, 27 ਮੈਟਾਬੋਲਾਈਟਾਂ ਦੇ ਇੱਕ ਸਮੂਹ ਨੂੰ ਸੁਭਾਵਕ ਅਤੇ ਘਾਤਕ ਨੋਡਿਊਲ ਵਿੱਚ ਫਰਕ ਕਰਨ ਲਈ ਪਛਾਣਿਆ ਗਿਆ ਸੀ।ਅੰਦਰੂਨੀ ਪ੍ਰਮਾਣਿਕਤਾ (n = 104) ਅਤੇ ਬਾਹਰੀ ਪ੍ਰਮਾਣਿਕਤਾ (n = 111) ਸਮੂਹਾਂ ਵਿੱਚ ਵਿਤਕਰੇ ਵਾਲੇ ਮਾਡਲ ਦਾ AUC ਕ੍ਰਮਵਾਰ 0.915 ਅਤੇ 0.945 ਸੀ।ਪਾਥਵੇਅ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਤੋਂ ਪਤਾ ਲੱਗਿਆ ਹੈ ਕਿ ਫੇਫੜਿਆਂ ਦੇ ਐਡੀਨੋਕਾਰਸੀਨੋਮਾ ਸੀਰਮ ਵਿੱਚ ਟ੍ਰਿਪਟੋਫਨ ਦੀ ਕਮੀ ਨਾਲ ਸੰਬੰਧਿਤ ਗਲਾਈਕੋਲਾਇਟਿਕ ਮੈਟਾਬੋਲਾਈਟਸ ਬੇਨਾਈਨ ਨੋਡਿਊਲਜ਼ ਅਤੇ ਸਿਹਤਮੰਦ ਨਿਯੰਤਰਣਾਂ ਦੀ ਤੁਲਨਾ ਵਿੱਚ, ਅਤੇ ਸੁਝਾਅ ਦਿੱਤਾ ਗਿਆ ਹੈ ਕਿ ਟ੍ਰਿਪਟੋਫੈਨ ਦਾ ਸੇਵਨ ਫੇਫੜਿਆਂ ਦੇ ਕੈਂਸਰ ਸੈੱਲਾਂ ਵਿੱਚ ਗਲਾਈਕੋਲਾਈਸਿਸ ਨੂੰ ਉਤਸ਼ਾਹਿਤ ਕਰਦਾ ਹੈ।ਸਾਡਾ ਅਧਿਐਨ ਸੀਟੀ ਦੁਆਰਾ ਖੋਜੇ ਗਏ ਪਲਮਨਰੀ ਨੋਡਿਊਲਜ਼ ਦੇ ਜੋਖਮ ਦਾ ਮੁਲਾਂਕਣ ਕਰਨ ਵਿੱਚ ਸੀਰਮ ਮੈਟਾਬੋਲਾਈਟ ਬਾਇਓਮਾਰਕਰਾਂ ਦੇ ਮੁੱਲ ਨੂੰ ਉਜਾਗਰ ਕਰਦਾ ਹੈ।
ਕੈਂਸਰ ਦੇ ਮਰੀਜ਼ਾਂ ਲਈ ਬਚਣ ਦੀਆਂ ਦਰਾਂ ਨੂੰ ਬਿਹਤਰ ਬਣਾਉਣ ਲਈ ਸ਼ੁਰੂਆਤੀ ਤਸ਼ਖੀਸ਼ ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ ਹੈ।ਯੂਐਸ ਨੈਸ਼ਨਲ ਲੰਗ ਕੈਂਸਰ ਸਕ੍ਰੀਨਿੰਗ ਟ੍ਰਾਇਲ (ਐਨਐਲਐਸਟੀ) ਅਤੇ ਯੂਰਪੀਅਨ ਨੇਲਸਨ ਅਧਿਐਨ ਦੇ ਨਤੀਜਿਆਂ ਨੇ ਦਿਖਾਇਆ ਹੈ ਕਿ ਘੱਟ-ਡੋਜ਼ ਕੰਪਿਊਟਿਡ ਟੋਮੋਗ੍ਰਾਫੀ (ਐਲਡੀਸੀਟੀ) ਨਾਲ ਸਕ੍ਰੀਨਿੰਗ ਉੱਚ-ਜੋਖਮ ਵਾਲੇ ਸਮੂਹਾਂ 1,2,3 ਵਿੱਚ ਫੇਫੜਿਆਂ ਦੇ ਕੈਂਸਰ ਦੀ ਮੌਤ ਦਰ ਨੂੰ ਮਹੱਤਵਪੂਰਣ ਰੂਪ ਵਿੱਚ ਘਟਾ ਸਕਦੀ ਹੈ।ਫੇਫੜਿਆਂ ਦੇ ਕੈਂਸਰ ਦੀ ਜਾਂਚ ਲਈ ਐਲਡੀਸੀਟੀ ਦੀ ਵਿਆਪਕ ਵਰਤੋਂ ਦੇ ਬਾਅਦ ਤੋਂ, ਅਸੈਂਪਟੋਮੈਟਿਕ ਪਲਮੋਨਰੀ ਨੋਡਿਊਲਜ਼ ਦੇ ਇਤਫਾਕਨ ਰੇਡੀਓਗ੍ਰਾਫਿਕ ਖੋਜਾਂ ਦੀਆਂ ਘਟਨਾਵਾਂ ਵਿੱਚ 4 ਵਾਧਾ ਹੁੰਦਾ ਰਿਹਾ ਹੈ।ਪਲਮਨਰੀ ਨੋਡਿਊਲਜ਼ ਨੂੰ 3 ਸੈਂਟੀਮੀਟਰ ਵਿਆਸ 5 ਤੱਕ ਫੋਕਲ ਓਪੈਸਿਟੀ ਵਜੋਂ ਪਰਿਭਾਸ਼ਿਤ ਕੀਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ।ਸਾਨੂੰ ਖ਼ਤਰਨਾਕਤਾ ਦੀ ਸੰਭਾਵਨਾ ਦਾ ਮੁਲਾਂਕਣ ਕਰਨ ਅਤੇ LDCT 'ਤੇ ਇਤਫ਼ਾਕ ਨਾਲ ਖੋਜੇ ਗਏ ਪਲਮਨਰੀ ਨੋਡਿਊਲਜ਼ ਦੀ ਵੱਡੀ ਗਿਣਤੀ ਨਾਲ ਨਜਿੱਠਣ ਵਿੱਚ ਮੁਸ਼ਕਲਾਂ ਦਾ ਸਾਹਮਣਾ ਕਰਨਾ ਪੈਂਦਾ ਹੈ।ਸੀਟੀ ਦੀਆਂ ਸੀਮਾਵਾਂ ਲਗਾਤਾਰ ਫਾਲੋ-ਅਪ ਪ੍ਰੀਖਿਆਵਾਂ ਅਤੇ ਗਲਤ-ਸਕਾਰਾਤਮਕ ਨਤੀਜੇ ਲੈ ਸਕਦੀਆਂ ਹਨ, ਜਿਸ ਨਾਲ ਬੇਲੋੜੀ ਦਖਲਅੰਦਾਜ਼ੀ ਅਤੇ ਜ਼ਿਆਦਾ ਇਲਾਜ ਹੋ ਸਕਦਾ ਹੈ।ਇਸ ਲਈ, ਸ਼ੁਰੂਆਤੀ ਪੜਾਵਾਂ ਵਿੱਚ ਫੇਫੜਿਆਂ ਦੇ ਕੈਂਸਰ ਦੀ ਸਹੀ ਪਛਾਣ ਕਰਨ ਲਈ ਭਰੋਸੇਮੰਦ ਅਤੇ ਉਪਯੋਗੀ ਬਾਇਓਮਾਰਕਰ ਵਿਕਸਿਤ ਕਰਨ ਦੀ ਜ਼ਰੂਰਤ ਹੈ ਅਤੇ ਸ਼ੁਰੂਆਤੀ ਖੋਜ 7 ਵਿੱਚ ਸਭ ਤੋਂ ਵਧੀਆ ਨੋਡਿਊਲ ਨੂੰ ਵੱਖ ਕਰਨਾ ਹੈ।
ਜੀਨੋਮਿਕਸ, ਪ੍ਰੋਟੀਓਮਿਕਸ ਜਾਂ ਡੀਐਨਏ ਮੈਥਾਈਲੇਸ਼ਨ 8,9,10 ਸਮੇਤ ਖੂਨ (ਸੀਰਮ, ਪਲਾਜ਼ਮਾ, ਪੈਰੀਫਿਰਲ ਖੂਨ ਦੇ ਮੋਨੋਨਿਊਕਲੀਅਰ ਸੈੱਲਾਂ) ਦੇ ਵਿਆਪਕ ਅਣੂ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਨੇ ਫੇਫੜਿਆਂ ਦੇ ਕੈਂਸਰ ਲਈ ਡਾਇਗਨੌਸਟਿਕ ਬਾਇਓਮਾਰਕਰਾਂ ਦੀ ਖੋਜ ਵਿੱਚ ਵਧ ਰਹੀ ਰੁਚੀ ਦੀ ਅਗਵਾਈ ਕੀਤੀ ਹੈ।ਇਸ ਦੌਰਾਨ, ਮੈਟਾਬੋਲੋਮਿਕਸ ਪਹੁੰਚ ਸੈਲੂਲਰ ਅੰਤ ਦੇ ਉਤਪਾਦਾਂ ਨੂੰ ਮਾਪਦੇ ਹਨ ਜੋ ਐਂਡੋਜੇਨਸ ਅਤੇ ਐਕਸੋਜੇਨਸ ਕਿਰਿਆਵਾਂ ਦੁਆਰਾ ਪ੍ਰਭਾਵਿਤ ਹੁੰਦੇ ਹਨ ਅਤੇ ਇਸਲਈ ਬਿਮਾਰੀ ਦੀ ਸ਼ੁਰੂਆਤ ਅਤੇ ਨਤੀਜਿਆਂ ਦੀ ਭਵਿੱਖਬਾਣੀ ਕਰਨ ਲਈ ਲਾਗੂ ਹੁੰਦੇ ਹਨ।ਤਰਲ ਕ੍ਰੋਮੈਟੋਗ੍ਰਾਫੀ-ਟੈਂਡਮ ਮਾਸ ਸਪੈਕਟਰੋਮੈਟਰੀ (LC-MS) ਇਸਦੀ ਉੱਚ ਸੰਵੇਦਨਸ਼ੀਲਤਾ ਅਤੇ ਵੱਡੀ ਗਤੀਸ਼ੀਲ ਰੇਂਜ ਦੇ ਕਾਰਨ ਮੈਟਾਬੋਲੋਮਿਕਸ ਅਧਿਐਨਾਂ ਲਈ ਇੱਕ ਵਿਆਪਕ ਤੌਰ 'ਤੇ ਵਰਤੀ ਜਾਂਦੀ ਵਿਧੀ ਹੈ, ਜੋ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਭੌਤਿਕ-ਰਸਾਇਣਕ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾਵਾਂ ਵਾਲੇ ਮੈਟਾਬੋਲਾਈਟਾਂ ਨੂੰ ਕਵਰ ਕਰ ਸਕਦੀ ਹੈ11,12,13।ਹਾਲਾਂਕਿ ਪਲਾਜ਼ਮਾ/ਸੀਰਮ ਦੇ ਗਲੋਬਲ ਮੈਟਾਬੋਲੋਮਿਕ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਫੇਫੜਿਆਂ ਦੇ ਕੈਂਸਰ ਦੇ ਨਿਦਾਨ 14,15,16,17 ਅਤੇ ਇਲਾਜ ਦੀ ਪ੍ਰਭਾਵਸ਼ੀਲਤਾ ਨਾਲ ਜੁੜੇ ਬਾਇਓਮਾਰਕਰਾਂ ਦੀ ਪਛਾਣ ਕਰਨ ਲਈ ਕੀਤੀ ਗਈ ਹੈ, 18 ਸੀਰਮ ਮੈਟਾਬੋਲਾਈਟ ਵਰਗੀਫਾਇਰ ਸੁਭਾਵਕ ਅਤੇ ਘਾਤਕ ਫੇਫੜਿਆਂ ਦੇ ਨੋਡਿਊਲ ਵਿੱਚ ਫਰਕ ਕਰਨ ਲਈ ਬਹੁਤ ਜ਼ਿਆਦਾ ਅਧਿਐਨ ਕੀਤਾ ਜਾਣਾ ਬਾਕੀ ਹੈ।- ਵਿਸ਼ਾਲ ਖੋਜ.
ਐਡੀਨੋਕਾਰਸੀਨੋਮਾ ਅਤੇ ਸਕੁਆਮਸ ਸੈੱਲ ਕਾਰਸੀਨੋਮਾ ਗੈਰ-ਛੋਟੇ ਸੈੱਲ ਫੇਫੜਿਆਂ ਦੇ ਕੈਂਸਰ (ਐਨਐਸਸੀਐਲਸੀ) ਦੀਆਂ ਦੋ ਮੁੱਖ ਉਪ ਕਿਸਮਾਂ ਹਨ।ਵੱਖ-ਵੱਖ ਸੀਟੀ ਸਕ੍ਰੀਨਿੰਗ ਟੈਸਟਾਂ ਤੋਂ ਪਤਾ ਲੱਗਦਾ ਹੈ ਕਿ ਐਡੀਨੋਕਾਰਸੀਨੋਮਾ ਫੇਫੜਿਆਂ ਦੇ ਕੈਂਸਰ ਦੀ ਸਭ ਤੋਂ ਆਮ ਹਿਸਟੌਲੋਜੀਕਲ ਕਿਸਮ 1,19,20,21 ਹੈ।ਇਸ ਅਧਿਐਨ ਵਿੱਚ, ਅਸੀਂ ਕੁੱਲ 695 ਸੀਰਮ ਨਮੂਨਿਆਂ 'ਤੇ ਮੈਟਾਬੋਲੋਮਿਕਸ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਕਰਨ ਲਈ ਅਲਟਰਾ-ਪ੍ਰਦਰਸ਼ਨ ਤਰਲ ਕ੍ਰੋਮੈਟੋਗ੍ਰਾਫੀ-ਹਾਈ-ਰੈਜ਼ੋਲਿਊਸ਼ਨ ਮਾਸ ਸਪੈਕਟ੍ਰੋਮੈਟਰੀ (UPLC-HRMS) ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕੀਤੀ, ਜਿਸ ਵਿੱਚ ਸਿਹਤਮੰਦ ਨਿਯੰਤਰਣ, ਸੁਭਾਵਕ ਪਲਮੋਨਰੀ ਨੋਡਿਊਲ, ਅਤੇ CT- ਖੋਜੇ ਗਏ ≤3 cm ਸ਼ਾਮਲ ਹਨ।ਪੜਾਅ I ਫੇਫੜਿਆਂ ਦੇ ਐਡੀਨੋਕਾਰਸੀਨੋਮਾ ਲਈ ਸਕ੍ਰੀਨਿੰਗ।ਅਸੀਂ ਸੀਰਮ ਮੈਟਾਬੋਲਾਈਟਸ ਦੇ ਇੱਕ ਪੈਨਲ ਦੀ ਪਛਾਣ ਕੀਤੀ ਹੈ ਜੋ ਫੇਫੜਿਆਂ ਦੇ ਐਡੀਨੋਕਾਰਸੀਨੋਮਾ ਨੂੰ ਸੁਭਾਵਕ ਨੋਡਿਊਲ ਅਤੇ ਸਿਹਤਮੰਦ ਨਿਯੰਤਰਣਾਂ ਤੋਂ ਵੱਖ ਕਰਦਾ ਹੈ।ਪਾਥਵੇਅ ਸੰਸ਼ੋਧਨ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਤੋਂ ਪਤਾ ਲੱਗਾ ਹੈ ਕਿ ਅਸਧਾਰਨ ਟ੍ਰਿਪਟੋਫਨ ਅਤੇ ਗਲੂਕੋਜ਼ ਮੈਟਾਬੋਲਿਜ਼ਮ ਫੇਫੜਿਆਂ ਦੇ ਐਡੀਨੋਕਾਰਸੀਨੋਮਾ ਵਿੱਚ ਸੁਭਾਵਕ ਨੋਡਿਊਲ ਅਤੇ ਸਿਹਤਮੰਦ ਨਿਯੰਤਰਣ ਦੇ ਮੁਕਾਬਲੇ ਆਮ ਤਬਦੀਲੀਆਂ ਹਨ।ਅੰਤ ਵਿੱਚ, ਅਸੀਂ ਐਲਡੀਸੀਟੀ ਦੁਆਰਾ ਖੋਜੇ ਗਏ ਘਾਤਕ ਅਤੇ ਸੁਭਾਵਕ ਪਲਮੋਨਰੀ ਨੋਡਿਊਲ ਵਿੱਚ ਫਰਕ ਕਰਨ ਲਈ ਉੱਚ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾ ਅਤੇ ਸੰਵੇਦਨਸ਼ੀਲਤਾ ਦੇ ਨਾਲ ਇੱਕ ਸੀਰਮ ਮੈਟਾਬੋਲਿਕ ਵਰਗੀਫਾਇਰ ਦੀ ਸਥਾਪਨਾ ਅਤੇ ਪ੍ਰਮਾਣਿਤ ਕੀਤਾ, ਜੋ ਕਿ ਸ਼ੁਰੂਆਤੀ ਅੰਤਰ ਨਿਦਾਨ ਅਤੇ ਜੋਖਮ ਮੁਲਾਂਕਣ ਵਿੱਚ ਸਹਾਇਤਾ ਕਰ ਸਕਦਾ ਹੈ।
ਮੌਜੂਦਾ ਅਧਿਐਨ ਵਿੱਚ, ਲਿੰਗ- ਅਤੇ ਉਮਰ-ਮੇਲ ਵਾਲੇ ਸੀਰਮ ਦੇ ਨਮੂਨੇ 174 ਸਿਹਤਮੰਦ ਨਿਯੰਤਰਣਾਂ ਤੋਂ, 292 ਮਰੀਜ਼ਾਂ ਦੇ ਸੁਭਾਵਕ ਪਲਮਨਰੀ ਨੋਡਿਊਲ, ਅਤੇ ਪੜਾਅ I ਫੇਫੜਿਆਂ ਦੇ ਐਡੀਨੋਕਾਰਸੀਨੋਮਾ ਵਾਲੇ 229 ਮਰੀਜ਼ਾਂ ਤੋਂ ਇਕੱਠੇ ਕੀਤੇ ਗਏ ਸਨ।695 ਵਿਸ਼ਿਆਂ ਦੀਆਂ ਜਨਸੰਖਿਆ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾਵਾਂ ਨੂੰ ਪੂਰਕ ਸਾਰਣੀ 1 ਵਿੱਚ ਦਿਖਾਇਆ ਗਿਆ ਹੈ।
ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਚਿੱਤਰ 1a ਵਿੱਚ ਦਿਖਾਇਆ ਗਿਆ ਹੈ, ਕੁੱਲ 480 ਸੀਰਮ ਨਮੂਨੇ, ਜਿਨ੍ਹਾਂ ਵਿੱਚ 174 ਸਿਹਤਮੰਦ ਨਿਯੰਤਰਣ (HC), 170 ਸੁਭਾਵਕ ਨੋਡਿਊਲ (BN), ਅਤੇ 136 ਪੜਾਅ I ਫੇਫੜੇ ਦੇ ਐਡੀਨੋਕਾਰਸੀਨੋਮਾ (LA) ਨਮੂਨੇ ਸ਼ਾਮਲ ਹਨ, ਸਨ ਯੈਟ-ਸੇਨ ਯੂਨੀਵਰਸਿਟੀ ਕੈਂਸਰ ਸੈਂਟਰ ਵਿੱਚ ਇਕੱਠੇ ਕੀਤੇ ਗਏ ਸਨ।ਅਲਟਰਾ-ਪ੍ਰਦਰਸ਼ਨ ਤਰਲ ਕ੍ਰੋਮੈਟੋਗ੍ਰਾਫੀ-ਹਾਈ-ਰੈਜ਼ੋਲਿਊਸ਼ਨ ਮਾਸ ਸਪੈਕਟਰੋਮੈਟਰੀ (UPLC-HRMS) ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੇ ਹੋਏ ਅਣ-ਨਿਸ਼ਾਨਾਬੱਧ ਮੈਟਾਬੋਲੋਮਿਕ ਪ੍ਰੋਫਾਈਲਿੰਗ ਲਈ ਖੋਜ ਸਮੂਹ।ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਸਪਲੀਮੈਂਟਰੀ ਚਿੱਤਰ 1 ਵਿੱਚ ਦਿਖਾਇਆ ਗਿਆ ਹੈ, LA ਅਤੇ HC, LA ਅਤੇ BN ਵਿਚਕਾਰ ਵਿਭਿੰਨ ਮੈਟਾਬੋਲਾਈਟਾਂ ਦੀ ਪਛਾਣ ਇੱਕ ਵਰਗੀਕਰਨ ਮਾਡਲ ਸਥਾਪਤ ਕਰਨ ਅਤੇ ਵਿਭਿੰਨ ਪਾਥਵੇਅ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਦੀ ਹੋਰ ਖੋਜ ਕਰਨ ਲਈ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ।ਸਨ ਯੈਟ-ਸੇਨ ਯੂਨੀਵਰਸਿਟੀ ਕੈਂਸਰ ਸੈਂਟਰ ਦੁਆਰਾ ਇਕੱਤਰ ਕੀਤੇ 104 ਨਮੂਨੇ ਅਤੇ ਦੋ ਹੋਰ ਹਸਪਤਾਲਾਂ ਦੁਆਰਾ ਇਕੱਤਰ ਕੀਤੇ 111 ਨਮੂਨੇ ਕ੍ਰਮਵਾਰ ਅੰਦਰੂਨੀ ਅਤੇ ਬਾਹਰੀ ਪ੍ਰਮਾਣਿਕਤਾ ਦੇ ਅਧੀਨ ਸਨ।
ਖੋਜ ਸਮੂਹ ਵਿੱਚ ਇੱਕ ਅਧਿਐਨ ਆਬਾਦੀ ਜਿਸ ਨੇ ਅਲਟਰਾ-ਪ੍ਰਦਰਸ਼ਨ ਤਰਲ ਕ੍ਰੋਮੈਟੋਗ੍ਰਾਫੀ-ਹਾਈ-ਰੈਜ਼ੋਲਿਊਸ਼ਨ ਮਾਸ ਸਪੈਕਟਰੋਮੈਟਰੀ (UPLC-HRMS) ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੇ ਹੋਏ ਗਲੋਬਲ ਸੀਰਮ ਮੈਟਾਬੋਲੋਮਿਕਸ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਕੀਤਾ।b ਅਧਿਐਨ ਸਮੂਹ ਤੋਂ 480 ਸੀਰਮ ਨਮੂਨਿਆਂ ਦੇ ਕੁੱਲ ਮੈਟਾਬੋਲੋਮ ਦਾ ਅੰਸ਼ਕ ਘੱਟੋ-ਘੱਟ ਵਰਗ ਭੇਦਭਾਵ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ (PLS-DA), ਸਿਹਤਮੰਦ ਨਿਯੰਤਰਣ (HC, n = 174), ਸੁਭਾਵਕ ਨੋਡਿਊਲ (BN, n = 170), ਅਤੇ ਪੜਾਅ I ਫੇਫੜਿਆਂ ਦੇ ਐਡੀਨੋਕਾਰਸੀਨੋਮਾ ਸਮੇਤ (ਲਾਸ ਏਂਜਲਸ, n = 136)।+ESI, ਸਕਾਰਾਤਮਕ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਸਪ੍ਰੇ ionization ਮੋਡ, -ESI, ਨਕਾਰਾਤਮਕ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਸਪ੍ਰੇ ionization ਮੋਡ.c–e ਮੈਟਾਬੋਲਾਈਟਸ ਦੋ ਦਿੱਤੇ ਗਏ ਸਮੂਹਾਂ (ਦੋ-ਟੇਲਡ ਵਿਲਕੋਕਸਨ ਸਾਈਨਡ ਰੈਂਕ ਟੈਸਟ, ਗਲਤ ਖੋਜ ਦਰ ਐਡਜਸਟਡ p ਮੁੱਲ, FDR <0.05) ਵਿੱਚ ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ ਤੌਰ 'ਤੇ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਭਰਪੂਰਤਾਵਾਂ ਦੇ ਨਾਲ ਲਾਲ (ਫੋਲਡ ਬਦਲਾਅ > 1.2) ਅਤੇ ਨੀਲੇ (ਫੋਲਡ ਬਦਲਾਅ <0.83) ਵਿੱਚ ਦਿਖਾਏ ਗਏ ਹਨ। .) ਜਵਾਲਾਮੁਖੀ ਗ੍ਰਾਫਿਕ 'ਤੇ ਦਿਖਾਇਆ ਗਿਆ ਹੈ।f ਲੜੀਵਾਰ ਕਲੱਸਟਰਿੰਗ ਹੀਟ ਮੈਪ LA ਅਤੇ BN ਵਿਚਕਾਰ ਐਨੋਟੇਟਿਡ ਮੈਟਾਬੋਲਾਈਟਾਂ ਦੀ ਸੰਖਿਆ ਵਿੱਚ ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ ਅੰਤਰ ਦਿਖਾ ਰਿਹਾ ਹੈ।ਸਰੋਤ ਡੇਟਾ ਸਰੋਤ ਡੇਟਾ ਫਾਈਲਾਂ ਦੇ ਰੂਪ ਵਿੱਚ ਪ੍ਰਦਾਨ ਕੀਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ।
ਖੋਜ ਸਮੂਹ ਵਿੱਚ 174 HC, 170 BN ਅਤੇ 136 LA ਦੇ ਕੁੱਲ ਸੀਰਮ ਮੈਟਾਬੋਲੋਮ ਦਾ UPLC-HRMS ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।ਅਸੀਂ ਪਹਿਲਾਂ ਦਿਖਾਉਂਦੇ ਹਾਂ ਕਿ ਗੁਣਵੱਤਾ ਨਿਯੰਤਰਣ (QC) ਨਮੂਨੇ ਇੱਕ ਅਣਸੁਪਰਵਾਈਜ਼ਡ ਪ੍ਰਿੰਸੀਪਲ ਕੰਪੋਨੈਂਟ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ (PCA) ਮਾਡਲ ਦੇ ਕੇਂਦਰ ਵਿੱਚ ਮਜ਼ਬੂਤੀ ਨਾਲ ਕਲੱਸਟਰ ਹੁੰਦੇ ਹਨ, ਜੋ ਮੌਜੂਦਾ ਅਧਿਐਨ ਦੇ ਪ੍ਰਦਰਸ਼ਨ ਦੀ ਸਥਿਰਤਾ ਦੀ ਪੁਸ਼ਟੀ ਕਰਦੇ ਹਨ (ਪੂਰਕ ਚਿੱਤਰ 2)।
ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਚਿੱਤਰ 1 ਬੀ ਵਿੱਚ ਅੰਸ਼ਕ ਘੱਟੋ-ਘੱਟ ਵਰਗ-ਵਿਤਕਰੇ ਵਾਲੇ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ (PLS-DA) ਵਿੱਚ ਦਿਖਾਇਆ ਗਿਆ ਹੈ, ਅਸੀਂ ਪਾਇਆ ਕਿ LA ਅਤੇ BN, LA ਅਤੇ HC ਵਿੱਚ ਸਕਾਰਾਤਮਕ (+ESI) ਅਤੇ ਨਕਾਰਾਤਮਕ (−ESI) ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਸਪ੍ਰੇ ਆਇਓਨਾਈਜ਼ੇਸ਼ਨ ਮੋਡਾਂ ਵਿੱਚ ਸਪਸ਼ਟ ਅੰਤਰ ਸਨ। .ਅਲੱਗ-ਥਲੱਗਹਾਲਾਂਕਿ, +ESI ਅਤੇ -ESI ਸਥਿਤੀਆਂ ਵਿੱਚ BN ਅਤੇ HC ਵਿਚਕਾਰ ਕੋਈ ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ ਅੰਤਰ ਨਹੀਂ ਮਿਲੇ ਹਨ।
ਸਾਨੂੰ LA ਅਤੇ HC ਦੇ ਵਿਚਕਾਰ 382 ਵਿਭਿੰਨ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾਵਾਂ, LA ਅਤੇ BN ਵਿਚਕਾਰ 231 ਵਿਭਿੰਨ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾਵਾਂ, ਅਤੇ BN ਅਤੇ HC ਵਿਚਕਾਰ 95 ਵਿਭਿੰਨ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾਵਾਂ (ਵਿਲਕੋਕਸਨ ਸਾਈਨਡ ਰੈਂਕ ਟੈਸਟ, FDR <0.05 ਅਤੇ ਮਲਟੀਪਲ ਪਰਿਵਰਤਨ > 1.2 ਜਾਂ <0.83) (ਚਿੱਤਰ .1c-e. )..ਇੱਕ ਡੇਟਾਬੇਸ (mzCloud/HMDB/Chemspider ਲਾਇਬ੍ਰੇਰੀ) ਦੇ ਵਿਰੁੱਧ M/z ਮੁੱਲ, ਰੀਟੈਨਸ਼ਨ ਟਾਈਮ ਅਤੇ ਫ੍ਰੈਗਮੈਂਟੇਸ਼ਨ ਮਾਸ ਸਪੈਕਟ੍ਰਮ ਖੋਜ (ਤਰੀਕਿਆਂ ਦੇ ਭਾਗ ਵਿੱਚ ਵਰਣਨ ਕੀਤੇ ਵੇਰਵੇ) 22 ਦੁਆਰਾ ਪੀਕਸ ਨੂੰ ਅੱਗੇ ਐਨੋਟੇਟ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ (ਪੂਰਕ ਡੇਟਾ 3)।ਅੰਤ ਵਿੱਚ, ਕ੍ਰਮਵਾਰ LA ਬਨਾਮ BN (ਚਿੱਤਰ 1f ਅਤੇ ਸਪਲੀਮੈਂਟਰੀ ਟੇਬਲ 2) ਅਤੇ LA ਬਨਾਮ HC (ਪੂਰਕ ਚਿੱਤਰ 3 ਅਤੇ ਪੂਰਕ ਸਾਰਣੀ 2) ਲਈ 33 ਅਤੇ 38 ਐਨੋਟੇਟਿਡ ਮੈਟਾਬੋਲਾਈਟਾਂ ਦੀ ਭਰਪੂਰਤਾ ਵਿੱਚ ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ ਅੰਤਰਾਂ ਦੇ ਨਾਲ ਪਛਾਣ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ।ਇਸਦੇ ਉਲਟ, BN ਅਤੇ HC (ਪੂਰਕ ਸਾਰਣੀ 2) ਵਿੱਚ ਭਰਪੂਰਤਾ ਵਿੱਚ ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ ਅੰਤਰਾਂ ਵਾਲੇ ਕੇਵਲ 3 ਮੈਟਾਬੋਲਾਈਟਾਂ ਦੀ ਪਛਾਣ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ, ਜੋ PLS-DA ਵਿੱਚ BN ਅਤੇ HC ਵਿਚਕਾਰ ਓਵਰਲੈਪ ਦੇ ਨਾਲ ਇਕਸਾਰ ਹੈ।ਇਹ ਵਿਭਿੰਨ ਮੈਟਾਬੋਲਾਈਟ ਬਾਇਓਕੈਮੀਕਲਜ਼ ਦੀ ਇੱਕ ਵਿਸ਼ਾਲ ਸ਼੍ਰੇਣੀ ਨੂੰ ਕਵਰ ਕਰਦੇ ਹਨ (ਪੂਰਕ ਚਿੱਤਰ 4)।ਇਕੱਠੇ ਕੀਤੇ ਗਏ, ਇਹ ਨਤੀਜੇ ਸੀਰਮ ਮੈਟਾਬੋਲੋਮ ਵਿੱਚ ਮਹੱਤਵਪੂਰਣ ਤਬਦੀਲੀਆਂ ਦਾ ਪ੍ਰਦਰਸ਼ਨ ਕਰਦੇ ਹਨ ਜੋ ਕਿ ਫੇਫੜਿਆਂ ਦੇ ਨੋਡਿਊਲ ਜਾਂ ਸਿਹਤਮੰਦ ਵਿਸ਼ਿਆਂ ਦੀ ਤੁਲਨਾ ਵਿੱਚ ਸ਼ੁਰੂਆਤੀ ਪੜਾਅ ਦੇ ਫੇਫੜਿਆਂ ਦੇ ਕੈਂਸਰ ਦੇ ਘਾਤਕ ਪਰਿਵਰਤਨ ਨੂੰ ਦਰਸਾਉਂਦੇ ਹਨ।ਇਸ ਦੌਰਾਨ, BN ਅਤੇ HC ਦੇ ਸੀਰਮ ਮੈਟਾਬੋਲੋਮ ਦੀ ਸਮਾਨਤਾ ਇਹ ਸੁਝਾਅ ਦਿੰਦੀ ਹੈ ਕਿ ਸੁਭਾਵਕ ਪਲਮਨਰੀ ਨੋਡਿਊਲ ਸਿਹਤਮੰਦ ਵਿਅਕਤੀਆਂ ਦੇ ਨਾਲ ਕਈ ਜੈਵਿਕ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾਵਾਂ ਨੂੰ ਸਾਂਝਾ ਕਰ ਸਕਦੇ ਹਨ।ਇਹ ਦੇਖਦੇ ਹੋਏ ਕਿ ਐਪੀਡਰਮਲ ਗਰੋਥ ਫੈਕਟਰ ਰੀਸੈਪਟਰ (EGFR) ਜੀਨ ਪਰਿਵਰਤਨ ਫੇਫੜਿਆਂ ਦੇ ਐਡੀਨੋਕਾਰਸੀਨੋਮਾ ਸਬ-ਟਾਈਪ 23 ਵਿੱਚ ਆਮ ਹਨ, ਅਸੀਂ ਸੀਰਮ ਮੈਟਾਬੋਲੋਮ 'ਤੇ ਡਰਾਈਵਰ ਪਰਿਵਰਤਨ ਦੇ ਪ੍ਰਭਾਵ ਨੂੰ ਨਿਰਧਾਰਤ ਕਰਨ ਦੀ ਕੋਸ਼ਿਸ਼ ਕੀਤੀ।ਫਿਰ ਅਸੀਂ ਫੇਫੜਿਆਂ ਦੇ ਐਡੀਨੋਕਾਰਸੀਨੋਮਾ ਸਮੂਹ ਵਿੱਚ ਈਜੀਐਫਆਰ ਸਥਿਤੀ ਵਾਲੇ 72 ਕੇਸਾਂ ਦੇ ਸਮੁੱਚੇ ਮੈਟਾਬੋਲੋਮਿਕ ਪ੍ਰੋਫਾਈਲ ਦਾ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਕੀਤਾ।ਦਿਲਚਸਪ ਗੱਲ ਇਹ ਹੈ ਕਿ, ਸਾਨੂੰ ਪੀਸੀਏ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ (ਪੂਰਕ ਚਿੱਤਰ 5a) ਵਿੱਚ EGFR ਪਰਿਵਰਤਨਸ਼ੀਲ ਮਰੀਜ਼ਾਂ (n = 41) ਅਤੇ EGFR ਜੰਗਲੀ-ਕਿਸਮ ਦੇ ਮਰੀਜ਼ਾਂ (n = 31) ਵਿਚਕਾਰ ਤੁਲਨਾਤਮਕ ਪ੍ਰੋਫਾਈਲ ਮਿਲੇ ਹਨ।ਹਾਲਾਂਕਿ, ਅਸੀਂ 7 ਮੈਟਾਬੋਲਾਈਟਾਂ ਦੀ ਪਛਾਣ ਕੀਤੀ ਜਿਨ੍ਹਾਂ ਦੀ ਭਰਪੂਰਤਾ ਨੂੰ EGFR ਪਰਿਵਰਤਨ ਵਾਲੇ ਮਰੀਜ਼ਾਂ ਵਿੱਚ ਜੰਗਲੀ-ਕਿਸਮ ਦੇ EGFR (t ਟੈਸਟ, p <0.05 ਅਤੇ ਫੋਲਡ ਬਦਲਾਅ> 1.2 ਜਾਂ <0.83) (ਪੂਰਕ ਚਿੱਤਰ 5b) ਦੇ ਮੁਕਾਬਲੇ ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ ਤੌਰ 'ਤੇ ਬਦਲਿਆ ਗਿਆ ਸੀ।ਇਹਨਾਂ ਵਿੱਚੋਂ ਜ਼ਿਆਦਾਤਰ ਮੈਟਾਬੋਲਾਈਟਸ (7 ਵਿੱਚੋਂ 5) ਐਸੀਲਕਾਰਨੀਟਾਈਨ ਹਨ, ਜੋ ਫੈਟੀ ਐਸਿਡ ਆਕਸੀਕਰਨ ਮਾਰਗਾਂ ਵਿੱਚ ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ ਭੂਮਿਕਾ ਨਿਭਾਉਂਦੇ ਹਨ।
ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਚਿੱਤਰ 2 a ਵਿੱਚ ਦਰਸਾਏ ਗਏ ਵਰਕਫਲੋ ਵਿੱਚ ਦਰਸਾਇਆ ਗਿਆ ਹੈ, ਨੋਡਿਊਲ ਵਰਗੀਕਰਣ ਲਈ ਬਾਇਓਮਾਰਕਰ ਘੱਟੋ ਘੱਟ ਸੰਕੁਚਿਤ ਸੰਕੁਚਨ ਓਪਰੇਟਰਾਂ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕੀਤੇ ਗਏ ਸਨ ਅਤੇ LA (n = 136) ਅਤੇ BN (n = 170) ਵਿੱਚ ਪਛਾਣੇ ਗਏ 33 ਵਿਭਿੰਨ ਮੈਟਾਬੋਲਾਈਟਾਂ ਦੇ ਅਧਾਰ ਤੇ ਚੋਣ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ।ਵੇਰੀਏਬਲ (LASSO) ਦਾ ਸਭ ਤੋਂ ਵਧੀਆ ਸੁਮੇਲ - ਬਾਈਨਰੀ ਲੌਜਿਸਟਿਕ ਰੀਗਰੈਸ਼ਨ ਮਾਡਲ।ਮਾਡਲ ਦੀ ਭਰੋਸੇਯੋਗਤਾ ਦੀ ਜਾਂਚ ਕਰਨ ਲਈ ਦਸ-ਗੁਣਾ ਕਰਾਸ-ਪ੍ਰਮਾਣਿਕਤਾ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ।ਵੇਰੀਏਬਲ ਚੋਣ ਅਤੇ ਪੈਰਾਮੀਟਰ ਰੈਗੂਲਰਾਈਜ਼ੇਸ਼ਨ ਨੂੰ ਪੈਰਾਮੀਟਰ λ24 ਦੇ ਨਾਲ ਇੱਕ ਸੰਭਾਵਨਾ ਵੱਧ ਤੋਂ ਵੱਧ ਜੁਰਮਾਨੇ ਦੁਆਰਾ ਐਡਜਸਟ ਕੀਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ।ਵਿਤਕਰੇ ਵਾਲੇ ਮਾਡਲ ਦੇ ਵਰਗੀਕਰਨ ਪ੍ਰਦਰਸ਼ਨ ਦੀ ਜਾਂਚ ਕਰਨ ਲਈ ਅੰਦਰੂਨੀ ਪ੍ਰਮਾਣਿਕਤਾ (n = 104) ਅਤੇ ਬਾਹਰੀ ਪ੍ਰਮਾਣਿਕਤਾ (n = 111) ਸਮੂਹਾਂ ਵਿੱਚ ਗਲੋਬਲ ਮੈਟਾਬੋਲੋਮਿਕਸ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਅੱਗੇ ਸੁਤੰਤਰ ਤੌਰ 'ਤੇ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।ਨਤੀਜੇ ਵਜੋਂ, ਖੋਜ ਸੈੱਟ ਵਿੱਚ 27 ਮੈਟਾਬੋਲਾਈਟਸ ਨੂੰ ਸਭ ਤੋਂ ਵੱਡਾ ਮਤਲਬ AUC ਮੁੱਲ (Fig. 2b) ਦੇ ਨਾਲ ਸਭ ਤੋਂ ਵਧੀਆ ਵਿਤਕਰੇ ਵਾਲੇ ਮਾਡਲ ਵਜੋਂ ਪਛਾਣਿਆ ਗਿਆ ਸੀ, ਜਿਨ੍ਹਾਂ ਵਿੱਚੋਂ 9 ਨੇ BN (Fig. 2c) ਦੀ ਤੁਲਨਾ ਵਿੱਚ LA ਵਿੱਚ ਗਤੀਵਿਧੀ ਵਿੱਚ ਵਾਧਾ ਕੀਤਾ ਸੀ ਅਤੇ 18 ਦੀ ਗਤੀਵਿਧੀ ਘਟੀ ਸੀ।
ਇੱਕ ਪਲਮਨਰੀ ਨੋਡਿਊਲ ਕਲਾਸੀਫਾਇਰ ਬਣਾਉਣ ਲਈ ਵਰਕਫਲੋ, ਜਿਸ ਵਿੱਚ ਦਸ ਗੁਣਾ ਕਰਾਸ-ਵੈਧੀਕਰਨ ਦੁਆਰਾ ਇੱਕ ਬਾਈਨਰੀ ਲੌਜਿਸਟਿਕ ਰੀਗਰੈਸ਼ਨ ਮਾਡਲ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੇ ਹੋਏ ਖੋਜ ਸੈੱਟ ਵਿੱਚ ਸੀਰਮ ਮੈਟਾਬੋਲਾਈਟਸ ਦੇ ਸਭ ਤੋਂ ਵਧੀਆ ਪੈਨਲ ਦੀ ਚੋਣ ਕਰਨਾ ਅਤੇ ਅੰਦਰੂਨੀ ਅਤੇ ਬਾਹਰੀ ਪ੍ਰਮਾਣਿਕਤਾ ਸੈੱਟਾਂ ਵਿੱਚ ਭਵਿੱਖਬਾਣੀ ਪ੍ਰਦਰਸ਼ਨ ਦਾ ਮੁਲਾਂਕਣ ਕਰਨਾ ਸ਼ਾਮਲ ਹੈ।b ਪਾਚਕ ਬਾਇਓਮਾਰਕਰ ਚੋਣ ਲਈ LASSO ਰਿਗਰੈਸ਼ਨ ਮਾਡਲ ਦੇ ਕਰਾਸ-ਪ੍ਰਮਾਣਿਕਤਾ ਅੰਕੜੇ।ਉੱਪਰ ਦਿੱਤੀਆਂ ਸੰਖਿਆਵਾਂ ਦਿੱਤੇ ਗਏ λ 'ਤੇ ਚੁਣੇ ਗਏ ਬਾਇਓਮਾਰਕਰਾਂ ਦੀ ਔਸਤ ਸੰਖਿਆ ਨੂੰ ਦਰਸਾਉਂਦੀਆਂ ਹਨ।ਲਾਲ ਬਿੰਦੀ ਵਾਲੀ ਲਾਈਨ ਸੰਬੰਧਿਤ ਲਾਂਬਡਾ 'ਤੇ ਔਸਤ AUC ਮੁੱਲ ਨੂੰ ਦਰਸਾਉਂਦੀ ਹੈ।ਸਲੇਟੀ ਗਲਤੀ ਪੱਟੀਆਂ ਘੱਟੋ-ਘੱਟ ਅਤੇ ਵੱਧ ਤੋਂ ਵੱਧ AUC ਮੁੱਲਾਂ ਨੂੰ ਦਰਸਾਉਂਦੀਆਂ ਹਨ।ਬਿੰਦੀ ਵਾਲੀ ਲਾਈਨ 27 ਚੁਣੇ ਹੋਏ ਬਾਇਓਮਾਰਕਰਾਂ ਦੇ ਨਾਲ ਸਭ ਤੋਂ ਵਧੀਆ ਮਾਡਲ ਨੂੰ ਦਰਸਾਉਂਦੀ ਹੈ।AUC, ਰਿਸੀਵਰ ਓਪਰੇਟਿੰਗ ਗੁਣ (ROC) ਕਰਵ ਦੇ ਅਧੀਨ ਖੇਤਰ।c ਖੋਜ ਸਮੂਹ ਵਿੱਚ BN ਸਮੂਹ ਦੇ ਮੁਕਾਬਲੇ LA ਸਮੂਹ ਵਿੱਚ 27 ਚੁਣੇ ਹੋਏ ਮੈਟਾਬੋਲਾਈਟਾਂ ਦੇ ਫੋਲਡ ਬਦਲਾਅ।ਲਾਲ ਕਾਲਮ - ਐਕਟੀਵੇਸ਼ਨ।ਨੀਲਾ ਕਾਲਮ ਇੱਕ ਗਿਰਾਵਟ ਹੈ।d–f ਰਿਸੀਵਰ ਓਪਰੇਟਿੰਗ ਗੁਣ (ROC) ਵਕਰ ਖੋਜ, ਅੰਦਰੂਨੀ ਅਤੇ ਬਾਹਰੀ ਪ੍ਰਮਾਣਿਕਤਾ ਸੈੱਟਾਂ ਵਿੱਚ 27 ਮੈਟਾਬੋਲਾਈਟ ਸੰਜੋਗਾਂ ਦੇ ਅਧਾਰ ਤੇ ਵਿਤਕਰੇ ਵਾਲੇ ਮਾਡਲ ਦੀ ਸ਼ਕਤੀ ਨੂੰ ਦਰਸਾਉਂਦਾ ਹੈ।ਸਰੋਤ ਡੇਟਾ ਸਰੋਤ ਡੇਟਾ ਫਾਈਲਾਂ ਦੇ ਰੂਪ ਵਿੱਚ ਪ੍ਰਦਾਨ ਕੀਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ।
ਇਹਨਾਂ 27 ਮੈਟਾਬੋਲਾਈਟਾਂ (ਪੂਰਕ ਸਾਰਣੀ 3) ਦੇ ਵੇਟਿਡ ਰਿਗਰੈਸ਼ਨ ਗੁਣਾਂ ਦੇ ਅਧਾਰ ਤੇ ਇੱਕ ਪੂਰਵ ਅਨੁਮਾਨ ਮਾਡਲ ਬਣਾਇਆ ਗਿਆ ਸੀ।ਇਹਨਾਂ 27 ਮੈਟਾਬੋਲਾਈਟਾਂ ਦੇ ਅਧਾਰ ਤੇ ਆਰਓਸੀ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਨੇ 0.933 ਦੇ ਕਰਵ (AUC) ਮੁੱਲ ਦੇ ਅਧੀਨ ਇੱਕ ਖੇਤਰ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕੀਤਾ, ਖੋਜ ਸਮੂਹ ਦੀ ਸੰਵੇਦਨਸ਼ੀਲਤਾ 0.868 ਸੀ, ਅਤੇ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾ 0.859 (ਚਿੱਤਰ 2d) ਸੀ।ਇਸ ਦੌਰਾਨ, LA ਅਤੇ HC ਵਿਚਕਾਰ 38 ਐਨੋਟੇਟਿਡ ਡਿਫਰੈਂਸ਼ੀਅਲ ਮੈਟਾਬੋਲਾਈਟਾਂ ਵਿੱਚੋਂ, 16 ਮੈਟਾਬੋਲਾਈਟਾਂ ਦੇ ਇੱਕ ਸਮੂਹ ਨੇ 0.801 ਦੀ ਸੰਵੇਦਨਸ਼ੀਲਤਾ ਦੇ ਨਾਲ 0.902 ਦਾ AUC ਪ੍ਰਾਪਤ ਕੀਤਾ ਅਤੇ HC (ਪੂਰਕ ਚਿੱਤਰ 6a-c) ਤੋਂ LA ਵਿਤਕਰੇ ਵਿੱਚ 0.856 ਦੀ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕੀਤੀ।ਡਿਫਰੈਂਸ਼ੀਅਲ ਮੈਟਾਬੋਲਾਈਟਸ ਲਈ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਫੋਲਡ ਪਰਿਵਰਤਨ ਥ੍ਰੈਸ਼ਹੋਲਡ 'ਤੇ ਆਧਾਰਿਤ AUC ਮੁੱਲਾਂ ਦੀ ਤੁਲਨਾ ਵੀ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ।ਅਸੀਂ ਪਾਇਆ ਕਿ ਵਰਗੀਕਰਣ ਮਾਡਲ ਨੇ LA ਅਤੇ BN (HC) ਵਿਚਕਾਰ ਵਿਤਕਰਾ ਕਰਨ ਵਿੱਚ ਸਭ ਤੋਂ ਵਧੀਆ ਪ੍ਰਦਰਸ਼ਨ ਕੀਤਾ ਜਦੋਂ ਫੋਲਡ ਤਬਦੀਲੀ ਦਾ ਪੱਧਰ 1.2 ਬਨਾਮ 1.5 ਜਾਂ 2.0 (ਪੂਰਕ ਚਿੱਤਰ 7a,b) 'ਤੇ ਸੈੱਟ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।ਵਰਗੀਕਰਨ ਮਾਡਲ, 27 ਮੈਟਾਬੋਲਾਈਟ ਸਮੂਹਾਂ ਦੇ ਅਧਾਰ ਤੇ, ਅੰਦਰੂਨੀ ਅਤੇ ਬਾਹਰੀ ਸਮੂਹਾਂ ਵਿੱਚ ਹੋਰ ਪ੍ਰਮਾਣਿਤ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।AUC ਅੰਦਰੂਨੀ ਪ੍ਰਮਾਣਿਕਤਾ ਲਈ 0.915 (ਸੰਵੇਦਨਸ਼ੀਲਤਾ 0.867, ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾ 0.811) ਅਤੇ ਬਾਹਰੀ ਪ੍ਰਮਾਣਿਕਤਾ (ਚਿੱਤਰ 2e, f) ਲਈ 0.945 (ਸੰਵੇਦਨਸ਼ੀਲਤਾ 0.810, ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾ 0.979) ਸੀ।ਅੰਤਰ-ਪ੍ਰਯੋਗਸ਼ਾਲਾ ਕੁਸ਼ਲਤਾ ਦਾ ਮੁਲਾਂਕਣ ਕਰਨ ਲਈ, ਬਾਹਰੀ ਸਮੂਹ ਦੇ 40 ਨਮੂਨਿਆਂ ਦਾ ਇੱਕ ਬਾਹਰੀ ਪ੍ਰਯੋਗਸ਼ਾਲਾ ਵਿੱਚ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਢੰਗ ਭਾਗ ਵਿੱਚ ਦੱਸਿਆ ਗਿਆ ਹੈ।ਵਰਗੀਕਰਨ ਸ਼ੁੱਧਤਾ ਨੇ 0.925 (ਪੂਰਕ ਚਿੱਤਰ 8) ਦਾ AUC ਪ੍ਰਾਪਤ ਕੀਤਾ।ਕਿਉਂਕਿ ਫੇਫੜਿਆਂ ਦੇ ਸਕੁਆਮਸ ਸੈੱਲ ਕਾਰਸੀਨੋਮਾ (LUSC) ਫੇਫੜਿਆਂ ਦੇ ਐਡੀਨੋਕਾਰਸੀਨੋਮਾ (LUAD) ਤੋਂ ਬਾਅਦ ਗੈਰ-ਛੋਟੇ ਸੈੱਲ ਫੇਫੜਿਆਂ ਦੇ ਕੈਂਸਰ (NSCLC) ਦਾ ਦੂਜਾ ਸਭ ਤੋਂ ਆਮ ਉਪ-ਕਿਸਮ ਹੈ, ਅਸੀਂ ਪਾਚਕ ਪ੍ਰੋਫਾਈਲਾਂ ਦੀ ਪ੍ਰਮਾਣਿਤ ਸੰਭਾਵੀ ਉਪਯੋਗਤਾ ਦੀ ਵੀ ਜਾਂਚ ਕੀਤੀ।BN ਅਤੇ LUSC ਦੇ 16 ਕੇਸ।LUSC ਅਤੇ BN ਵਿਚਕਾਰ ਵਿਤਕਰੇ ਦਾ AUC 0.776 ਸੀ (ਪੂਰਕ ਚਿੱਤਰ 9), ਜੋ ਕਿ LUAD ਅਤੇ BN ਵਿਚਕਾਰ ਵਿਤਕਰੇ ਦੀ ਤੁਲਨਾ ਵਿੱਚ ਕਮਜ਼ੋਰ ਯੋਗਤਾ ਨੂੰ ਦਰਸਾਉਂਦਾ ਹੈ।
ਅਧਿਐਨਾਂ ਨੇ ਦਿਖਾਇਆ ਹੈ ਕਿ ਸੀਟੀ ਚਿੱਤਰਾਂ 'ਤੇ ਨੋਡਿਊਲ ਦਾ ਆਕਾਰ ਖ਼ਤਰਨਾਕਤਾ ਦੀ ਸੰਭਾਵਨਾ ਨਾਲ ਸਕਾਰਾਤਮਕ ਤੌਰ 'ਤੇ ਸਬੰਧਿਤ ਹੈ ਅਤੇ ਨੋਡਿਊਲ ਦੇ ਇਲਾਜ 25,26,27 ਦਾ ਮੁੱਖ ਨਿਰਣਾਇਕ ਬਣਿਆ ਹੋਇਆ ਹੈ।NELSON ਸਕ੍ਰੀਨਿੰਗ ਅਧਿਐਨ ਦੇ ਵੱਡੇ ਸਮੂਹ ਦੇ ਅੰਕੜਿਆਂ ਦੇ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਨੇ ਦਿਖਾਇਆ ਕਿ ਨੋਡ <5 ਮਿਲੀਮੀਟਰ ਵਾਲੇ ਵਿਸ਼ਿਆਂ ਵਿੱਚ ਖ਼ਤਰਨਾਕਤਾ ਦਾ ਜੋਖਮ ਨੋਡ 28 ਤੋਂ ਬਿਨਾਂ ਵਿਸ਼ਿਆਂ ਵਿੱਚ ਵੀ ਸਮਾਨ ਸੀ।ਇਸ ਲਈ, ਬ੍ਰਿਟਿਸ਼ ਥੌਰੇਸਿਕ ਸੋਸਾਇਟੀ (ਬੀਟੀਐਸ) ਦੁਆਰਾ ਸਿਫ਼ਾਰਸ਼ ਕੀਤੇ ਅਨੁਸਾਰ, ਨਿਯਮਤ ਸੀਟੀ ਨਿਗਰਾਨੀ ਦੀ ਲੋੜ ਲਈ ਘੱਟੋ-ਘੱਟ ਆਕਾਰ 5 ਮਿਲੀਮੀਟਰ ਹੈ, ਅਤੇ ਫਲੀਸ਼ਨਰ ਸੁਸਾਇਟੀ 29 ਦੁਆਰਾ ਸਿਫ਼ਾਰਸ਼ ਕੀਤੇ ਅਨੁਸਾਰ 6 ਮਿਲੀਮੀਟਰ ਹੈ।ਹਾਲਾਂਕਿ, 6 ਮਿਲੀਮੀਟਰ ਤੋਂ ਵੱਡੇ ਨੋਡਿਊਲ ਅਤੇ ਸਪੱਸ਼ਟ ਸੁਭਾਵਕ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾਵਾਂ ਤੋਂ ਬਿਨਾਂ, ਜਿਨ੍ਹਾਂ ਨੂੰ ਅਨਿਸ਼ਚਿਤ ਪਲਮਨਰੀ ਨੋਡਿਊਲ (IPN) ਕਿਹਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਕਲੀਨਿਕਲ ਅਭਿਆਸ 30,31 ਵਿੱਚ ਮੁਲਾਂਕਣ ਅਤੇ ਪ੍ਰਬੰਧਨ ਵਿੱਚ ਇੱਕ ਵੱਡੀ ਚੁਣੌਤੀ ਬਣੇ ਹੋਏ ਹਨ।ਅਸੀਂ ਅਗਲੀ ਜਾਂਚ ਕੀਤੀ ਕਿ ਕੀ ਖੋਜ ਅਤੇ ਅੰਦਰੂਨੀ ਪ੍ਰਮਾਣਿਕਤਾ ਸਮੂਹਾਂ ਤੋਂ ਪੂਲ ਕੀਤੇ ਨਮੂਨਿਆਂ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੇ ਹੋਏ ਨੋਡਿਊਲ ਆਕਾਰ ਨੇ ਮੈਟਾਬੋਲੋਮਿਕ ਦਸਤਖਤਾਂ ਨੂੰ ਪ੍ਰਭਾਵਿਤ ਕੀਤਾ ਹੈ।27 ਪ੍ਰਮਾਣਿਤ ਬਾਇਓਮਾਰਕਰਾਂ 'ਤੇ ਫੋਕਸ ਕਰਦੇ ਹੋਏ, ਅਸੀਂ ਪਹਿਲਾਂ HC ਅਤੇ BN ਸਬ-6 mm ਮੈਟਾਬੋਲੋਮਜ਼ ਦੇ ਪੀਸੀਏ ਪ੍ਰੋਫਾਈਲਾਂ ਦੀ ਤੁਲਨਾ ਕੀਤੀ।ਅਸੀਂ ਪਾਇਆ ਹੈ ਕਿ HC ਅਤੇ BN ਲਈ ਜ਼ਿਆਦਾਤਰ ਡੇਟਾ ਪੁਆਇੰਟ ਓਵਰਲੈਪ ਕੀਤੇ ਗਏ ਹਨ, ਇਹ ਦਰਸਾਉਂਦੇ ਹਨ ਕਿ ਸੀਰਮ ਮੈਟਾਬੋਲਾਈਟ ਪੱਧਰ ਦੋਵਾਂ ਸਮੂਹਾਂ (ਚਿੱਤਰ 3a) ਵਿੱਚ ਸਮਾਨ ਸਨ।BN ਅਤੇ LA (ਚਿੱਤਰ 3b, c) ਵਿੱਚ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਆਕਾਰ ਦੀਆਂ ਰੇਂਜਾਂ ਵਿੱਚ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾ ਦੇ ਨਕਸ਼ੇ ਸੁਰੱਖਿਅਤ ਰਹੇ, ਜਦੋਂ ਕਿ 6-20 ਮਿਲੀਮੀਟਰ ਰੇਂਜ (ਚਿੱਤਰ 3d) ਵਿੱਚ ਘਾਤਕ ਅਤੇ ਸੁਭਾਵਕ ਨੋਡਿਊਲ ਵਿਚਕਾਰ ਇੱਕ ਵੱਖਰਾ ਦੇਖਿਆ ਗਿਆ।ਇਸ ਸਮੂਹ ਵਿੱਚ 0.927 ਦੀ AUC, 0.868 ਦੀ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾ, ਅਤੇ 0.820 ਦੀ ਸੰਵੇਦਨਸ਼ੀਲਤਾ 6 ਤੋਂ 20 ਮਿਲੀਮੀਟਰ (ਚਿੱਤਰ 3e, f) ਦੇ ਮਾਪ ਵਾਲੇ ਨੋਡਿਊਲਾਂ ਦੀ ਖ਼ਤਰਨਾਕਤਾ ਦੀ ਭਵਿੱਖਬਾਣੀ ਕਰਨ ਲਈ ਸੀ।ਸਾਡੇ ਨਤੀਜੇ ਦਰਸਾਉਂਦੇ ਹਨ ਕਿ ਵਰਗੀਕਰਣ ਨੋਡਿਊਲ ਦੇ ਆਕਾਰ ਦੀ ਪਰਵਾਹ ਕੀਤੇ ਬਿਨਾਂ, ਸ਼ੁਰੂਆਤੀ ਘਾਤਕ ਪਰਿਵਰਤਨ ਕਾਰਨ ਹੋਣ ਵਾਲੇ ਪਾਚਕ ਤਬਦੀਲੀਆਂ ਨੂੰ ਹਾਸਲ ਕਰ ਸਕਦਾ ਹੈ।
ad 27 ਮੈਟਾਬੋਲਾਈਟਾਂ ਦੇ ਇੱਕ ਪਾਚਕ ਵਰਗੀਕਰਣ ਦੇ ਅਧਾਰ ਤੇ ਨਿਰਧਾਰਤ ਸਮੂਹਾਂ ਵਿੱਚ PCA ਪ੍ਰੋਫਾਈਲਾਂ ਦੀ ਤੁਲਨਾ।CC ਅਤੇ BN <6 ਮਿਲੀਮੀਟਰ।b BN <6 mm ਬਨਾਮ BN 6–20 mm।LA 6–20 mm ਬਨਾਮ LA 20–30 mm ਵਿੱਚ।g BN 6–20 mm ਅਤੇ LA 6–20 mm।GC, n = 174;BN <6 mm, n = 153;BN 6–20 mm, n = 91;LA 6–20 mm, n = 89;LA 20–30 mm, n = 77. e ਰਿਸੀਵਰ ਓਪਰੇਟਿੰਗ ਗੁਣ (ROC) ਕਰਵ ਨੋਡਿਊਲ 6-20 mm ਲਈ ਵਿਤਕਰੇ ਵਾਲੇ ਮਾਡਲ ਪ੍ਰਦਰਸ਼ਨ ਨੂੰ ਦਰਸਾਉਂਦਾ ਹੈ।f ਸੰਭਾਵੀ ਮੁੱਲਾਂ ਦੀ ਗਣਨਾ 6-20 ਮਿਲੀਮੀਟਰ ਦੇ ਨੋਡਿਊਲ ਲਈ ਲੌਜਿਸਟਿਕ ਰੀਗਰੈਸ਼ਨ ਮਾਡਲ ਦੇ ਆਧਾਰ 'ਤੇ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ।ਸਲੇਟੀ ਬਿੰਦੀ ਵਾਲੀ ਲਾਈਨ ਅਨੁਕੂਲ ਕੱਟਆਫ ਮੁੱਲ (0.455) ਨੂੰ ਦਰਸਾਉਂਦੀ ਹੈ।ਉਪਰੋਕਤ ਸੰਖਿਆ ਲਾਸ ਏਂਜਲਸ ਲਈ ਅਨੁਮਾਨਿਤ ਕੇਸਾਂ ਦੀ ਪ੍ਰਤੀਸ਼ਤਤਾ ਨੂੰ ਦਰਸਾਉਂਦੀ ਹੈ।ਦੋ-ਪੂਛ ਵਾਲੇ ਵਿਦਿਆਰਥੀ ਦੇ ਟੀ ਟੈਸਟ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰੋ।PCA, ਮੁੱਖ ਭਾਗ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ।ਕਰਵ ਦੇ ਅਧੀਨ AUC ਖੇਤਰ।ਸਰੋਤ ਡੇਟਾ ਸਰੋਤ ਡੇਟਾ ਫਾਈਲਾਂ ਦੇ ਰੂਪ ਵਿੱਚ ਪ੍ਰਦਾਨ ਕੀਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ।
ਪ੍ਰਸਤਾਵਿਤ ਖ਼ਤਰਨਾਕ ਭਵਿੱਖਬਾਣੀ ਮਾਡਲ (ਚਿੱਤਰ 4a, b) ਦੀ ਕਾਰਗੁਜ਼ਾਰੀ ਨੂੰ ਦਰਸਾਉਣ ਲਈ ਸਮਾਨ ਪਲਮਨਰੀ ਨੋਡਿਊਲ ਆਕਾਰ (7-9 ਮਿਲੀਮੀਟਰ) ਵਾਲੇ ਚਾਰ ਨਮੂਨੇ (ਉਮਰ 44-61 ਸਾਲ) ਨੂੰ ਅੱਗੇ ਚੁਣਿਆ ਗਿਆ ਸੀ।ਸ਼ੁਰੂਆਤੀ ਸਕ੍ਰੀਨਿੰਗ 'ਤੇ, ਕੇਸ 1 ਨੂੰ ਕੈਲਸੀਫੀਕੇਸ਼ਨ ਦੇ ਨਾਲ ਇੱਕ ਠੋਸ ਨੋਡਿਊਲ ਦੇ ਰੂਪ ਵਿੱਚ ਪੇਸ਼ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ, ਇੱਕ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾ ਸੁਭਾਵਕਤਾ ਨਾਲ ਜੁੜੀ ਹੋਈ ਹੈ, ਜਦੋਂ ਕਿ ਕੇਸ 2 ਬਿਨਾਂ ਕਿਸੇ ਸਪੱਸ਼ਟ ਸੁਭਾਵਕ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾਵਾਂ ਦੇ ਇੱਕ ਅਨਿਸ਼ਚਿਤ ਅੰਸ਼ਕ ਤੌਰ 'ਤੇ ਠੋਸ ਨੋਡਿਊਲ ਵਜੋਂ ਪੇਸ਼ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਹੈ।ਫਾਲੋ-ਅਪ ਸੀਟੀ ਸਕੈਨ ਦੇ ਤਿੰਨ ਦੌਰ ਨੇ ਦਿਖਾਇਆ ਕਿ ਇਹ ਕੇਸ 4-ਸਾਲ ਦੀ ਮਿਆਦ ਵਿੱਚ ਸਥਿਰ ਰਹੇ ਅਤੇ ਇਸਲਈ ਇਹਨਾਂ ਨੂੰ ਸੁਭਾਵਕ ਨੋਡਿਊਲ (ਚਿੱਤਰ 4a) ਮੰਨਿਆ ਗਿਆ।ਸੀਰੀਅਲ ਸੀਟੀ ਸਕੈਨ ਦੇ ਕਲੀਨਿਕਲ ਮੁਲਾਂਕਣ ਦੀ ਤੁਲਨਾ ਵਿੱਚ, ਮੌਜੂਦਾ ਕਲਾਸੀਫਾਇਰ ਮਾਡਲ ਦੇ ਨਾਲ ਸਿੰਗਲ-ਸ਼ਾਟ ਸੀਰਮ ਮੈਟਾਬੋਲਾਈਟ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਨੇ ਸੰਭਾਵੀ ਰੁਕਾਵਟਾਂ (ਟੇਬਲ 1) ਦੇ ਅਧਾਰ ਤੇ ਇਹਨਾਂ ਸੁਭਾਵਕ ਨੋਡਿਊਲਾਂ ਨੂੰ ਤੇਜ਼ੀ ਨਾਲ ਅਤੇ ਸਹੀ ਢੰਗ ਨਾਲ ਪਛਾਣਿਆ।ਕੇਸ 3 ਵਿੱਚ ਚਿੱਤਰ 4b ਇੱਕ ਨੋਡਿਊਲ ਦਿਖਾਉਂਦਾ ਹੈ ਜਿਸ ਵਿੱਚ pleural retraction ਦੇ ਸੰਕੇਤ ਹੁੰਦੇ ਹਨ, ਜੋ ਕਿ ਅਕਸਰ ਖ਼ਤਰਨਾਕਤਾ32 ਨਾਲ ਜੁੜਿਆ ਹੁੰਦਾ ਹੈ।ਕੇਸ 4 ਇੱਕ ਅਨਿਸ਼ਚਿਤ ਅੰਸ਼ਕ ਤੌਰ 'ਤੇ ਠੋਸ ਨੋਡਿਊਲ ਦੇ ਰੂਪ ਵਿੱਚ ਪੇਸ਼ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਹੈ ਜਿਸਦਾ ਕੋਈ ਸਬੂਤ ਨਹੀਂ ਹੈ।ਇਹ ਸਾਰੇ ਕੇਸ ਵਰਗੀਕਰਣ ਮਾਡਲ (ਟੇਬਲ 1) ਦੇ ਅਨੁਸਾਰ ਘਾਤਕ ਹੋਣ ਦੀ ਭਵਿੱਖਬਾਣੀ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ।ਫੇਫੜਿਆਂ ਦੇ ਐਡੀਨੋਕਾਰਸੀਨੋਮਾ ਦਾ ਮੁਲਾਂਕਣ ਫੇਫੜਿਆਂ ਦੀ ਰੀਸੈਕਸ਼ਨ ਸਰਜਰੀ (ਚਿੱਤਰ 4b) ਤੋਂ ਬਾਅਦ ਹਿਸਟੋਪੈਥੋਲੋਜੀਕਲ ਪ੍ਰੀਖਿਆ ਦੁਆਰਾ ਪ੍ਰਦਰਸ਼ਿਤ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।ਬਾਹਰੀ ਪ੍ਰਮਾਣਿਕਤਾ ਸੈੱਟ ਲਈ, ਪਾਚਕ ਵਰਗੀਕਰਣ ਨੇ 6 ਮਿਲੀਮੀਟਰ (ਪੂਰਕ ਚਿੱਤਰ 10) ਤੋਂ ਵੱਡੇ ਅਨਿਸ਼ਚਿਤ ਫੇਫੜਿਆਂ ਦੇ ਨੋਡਿਊਲ ਦੇ ਦੋ ਮਾਮਲਿਆਂ ਦੀ ਸਹੀ ਭਵਿੱਖਬਾਣੀ ਕੀਤੀ ਹੈ।
ਸੁਭਾਵਕ ਨੋਡਿਊਲਜ਼ ਦੇ ਦੋ ਕੇਸਾਂ ਦੇ ਫੇਫੜਿਆਂ ਦੀ ਧੁਰੀ ਵਿੰਡੋ ਦੀਆਂ ਸੀਟੀ ਤਸਵੀਰਾਂ।ਕੇਸ 1 ਵਿੱਚ, 4 ਸਾਲਾਂ ਬਾਅਦ ਸੀਟੀ ਸਕੈਨ ਨੇ ਸੱਜੇ ਹੇਠਲੇ ਲੋਬ ਵਿੱਚ ਕੈਲਸੀਫਿਕੇਸ਼ਨ ਦੇ ਨਾਲ 7 ਮਿਲੀਮੀਟਰ ਮਾਪਣ ਵਾਲਾ ਇੱਕ ਸਥਿਰ ਠੋਸ ਨੋਡਿਊਲ ਦਿਖਾਇਆ।ਕੇਸ 2 ਵਿੱਚ, 5 ਸਾਲਾਂ ਬਾਅਦ ਸੀਟੀ ਸਕੈਨ ਨੇ ਸੱਜੇ ਉਪਰਲੇ ਲੋਬ ਵਿੱਚ 7 ​​ਮਿਲੀਮੀਟਰ ਦੇ ਵਿਆਸ ਦੇ ਨਾਲ ਇੱਕ ਸਥਿਰ, ਅੰਸ਼ਕ ਤੌਰ 'ਤੇ ਠੋਸ ਨੋਡਿਊਲ ਦਾ ਖੁਲਾਸਾ ਕੀਤਾ।b ਫੇਫੜਿਆਂ ਦੇ ਐਕਸੀਅਲ ਵਿੰਡੋ ਸੀਟੀ ਚਿੱਤਰ ਅਤੇ ਫੇਫੜਿਆਂ ਦੇ ਰਿਸੈਕਸ਼ਨ ਤੋਂ ਪਹਿਲਾਂ ਪੜਾਅ I ਐਡੀਨੋਕਾਰਸੀਨੋਮਾ ਦੇ ਦੋ ਕੇਸਾਂ ਦੇ ਅਨੁਸਾਰੀ ਪੈਥੋਲੋਜੀਕਲ ਅਧਿਐਨ।ਕੇਸ 3 ਨੇ 8 ਮਿਲੀਮੀਟਰ ਦੇ ਵਿਆਸ ਦੇ ਨਾਲ ਇੱਕ ਨੋਡਿਊਲ ਦਾ ਖੁਲਾਸਾ ਕੀਤਾ ਹੈ ਜਿਸਦਾ ਸੱਜੇ ਉਪਰਲੇ ਲੋਬ ਵਿੱਚ ਪਲਿਊਲ ਰੀਟ੍ਰੈਕਸ਼ਨ ਹੈ।ਕੇਸ 4 ਨੇ ਖੱਬੇ ਉਪਰਲੇ ਲੋਬ ਵਿੱਚ 9 ਮਿਲੀਮੀਟਰ ਮਾਪਣ ਵਾਲੇ ਇੱਕ ਅੰਸ਼ਕ ਤੌਰ 'ਤੇ ਠੋਸ ਜ਼ਮੀਨ-ਗਲਾਸ ਨੋਡਿਊਲ ਦਾ ਖੁਲਾਸਾ ਕੀਤਾ।ਹੇਮੇਟੋਕਸੀਲਿਨ ਅਤੇ ਈਓਸਿਨ (H&E) ਫੇਫੜਿਆਂ ਦੇ ਟਿਸ਼ੂ (ਸਕੇਲ ਬਾਰ = 50 μm) ਦੇ ਧੱਬੇ, ਜੋ ਕਿ ਫੇਫੜਿਆਂ ਦੇ ਐਡੀਨੋਕਾਰਸੀਨੋਮਾ ਦੇ ਐਸੀਨਾਰ ਵਿਕਾਸ ਪੈਟਰਨ ਨੂੰ ਦਰਸਾਉਂਦੇ ਹਨ।ਤੀਰ CT ਚਿੱਤਰਾਂ 'ਤੇ ਖੋਜੇ ਗਏ ਨੋਡਿਊਲ ਨੂੰ ਦਰਸਾਉਂਦੇ ਹਨ।H&E ਚਿੱਤਰ ਪੈਥੋਲੋਜਿਸਟ ਦੁਆਰਾ ਜਾਂਚੇ ਗਏ ਮਲਟੀਪਲ (>3) ਮਾਈਕ੍ਰੋਸਕੋਪਿਕ ਖੇਤਰਾਂ ਦੀਆਂ ਪ੍ਰਤੀਨਿਧ ਤਸਵੀਰਾਂ ਹਨ।
ਇਕੱਠੇ ਕੀਤੇ ਗਏ, ਸਾਡੇ ਨਤੀਜੇ ਪਲਮਨਰੀ ਨੋਡਿਊਲਜ਼ ਦੇ ਵਿਭਿੰਨ ਨਿਦਾਨ ਵਿੱਚ ਸੀਰਮ ਮੈਟਾਬੋਲਾਈਟ ਬਾਇਓਮਾਰਕਰਾਂ ਦੇ ਸੰਭਾਵੀ ਮੁੱਲ ਨੂੰ ਦਰਸਾਉਂਦੇ ਹਨ, ਜੋ ਸੀਟੀ ਸਕ੍ਰੀਨਿੰਗ ਦਾ ਮੁਲਾਂਕਣ ਕਰਦੇ ਸਮੇਂ ਚੁਣੌਤੀਆਂ ਪੈਦਾ ਕਰ ਸਕਦੇ ਹਨ।
ਇੱਕ ਪ੍ਰਮਾਣਿਤ ਡਿਫਰੈਂਸ਼ੀਅਲ ਮੈਟਾਬੋਲਾਈਟ ਪੈਨਲ ਦੇ ਅਧਾਰ ਤੇ, ਅਸੀਂ ਮੁੱਖ ਪਾਚਕ ਤਬਦੀਲੀਆਂ ਦੇ ਜੈਵਿਕ ਸਬੰਧਾਂ ਦੀ ਪਛਾਣ ਕਰਨ ਦੀ ਕੋਸ਼ਿਸ਼ ਕੀਤੀ।MetaboAnalyst ਦੁਆਰਾ KEGG ਪਾਥਵੇਅ ਸੰਸ਼ੋਧਨ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਨੇ ਦੋ ਦਿੱਤੇ ਗਏ ਸਮੂਹਾਂ (LA ਬਨਾਮ HC ਅਤੇ LA ਬਨਾਮ BN, ਐਡਜਸਟਡ p ≤ 0.001, ਪ੍ਰਭਾਵ > 0.01) ਦੇ ਵਿਚਕਾਰ 6 ਆਮ ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ ਤੌਰ 'ਤੇ ਬਦਲੇ ਹੋਏ ਮਾਰਗਾਂ ਦੀ ਪਛਾਣ ਕੀਤੀ।ਇਹ ਤਬਦੀਲੀਆਂ ਪਾਈਰੂਵੇਟ ਮੈਟਾਬੋਲਿਜ਼ਮ, ਟ੍ਰਿਪਟੋਫਨ ਮੈਟਾਬੋਲਿਜ਼ਮ, ਨਿਆਸੀਨ ਅਤੇ ਨਿਕੋਟੀਨਾਮਾਈਡ ਮੈਟਾਬੋਲਿਜ਼ਮ, ਗਲਾਈਕੋਲਾਈਸਿਸ, ਟੀਸੀਏ ਚੱਕਰ, ਅਤੇ ਪਿਊਰੀਨ ਮੈਟਾਬੋਲਿਜ਼ਮ (ਚਿੱਤਰ 5a) ਵਿੱਚ ਗੜਬੜੀਆਂ ਦੁਆਰਾ ਦਰਸਾਈਆਂ ਗਈਆਂ ਸਨ।ਅਸੀਂ ਫਿਰ ਸੰਪੂਰਨ ਮਾਤਰਾ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੇ ਹੋਏ ਵੱਡੀਆਂ ਤਬਦੀਲੀਆਂ ਦੀ ਪੁਸ਼ਟੀ ਕਰਨ ਲਈ ਟਾਰਗੇਟਡ ਮੈਟਾਬੋਲੋਮਿਕਸ ਦਾ ਪ੍ਰਦਰਸ਼ਨ ਕੀਤਾ।ਪ੍ਰਮਾਣਿਕ ​​ਮੈਟਾਬੋਲਾਈਟ ਮਾਪਦੰਡਾਂ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੇ ਹੋਏ ਟ੍ਰਿਪਲ ਕਵਾਡ੍ਰਪੋਲ ਮਾਸ ਸਪੈਕਟ੍ਰੋਮੈਟਰੀ (QQQ) ਦੁਆਰਾ ਆਮ ਤੌਰ 'ਤੇ ਬਦਲੇ ਹੋਏ ਮਾਰਗਾਂ ਵਿੱਚ ਆਮ ਮੈਟਾਬੋਲਾਈਟਾਂ ਦਾ ਨਿਰਧਾਰਨ।ਮੈਟਾਬੋਲੋਮਿਕਸ ਸਟੱਡੀ ਟੀਚੇ ਦੇ ਨਮੂਨੇ ਦੀਆਂ ਜਨਸੰਖਿਆ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾਵਾਂ ਨੂੰ ਪੂਰਕ ਸਾਰਣੀ 4 ਵਿੱਚ ਸ਼ਾਮਲ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਹੈ. ਸਾਡੇ ਗਲੋਬਲ ਮੈਟਾਬੋਲੋਮਿਕਸ ਨਤੀਜਿਆਂ ਦੇ ਨਾਲ ਇਕਸਾਰ, ਮਾਤਰਾਤਮਕ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਨੇ ਪੁਸ਼ਟੀ ਕੀਤੀ ਕਿ ਬੀਐਨ ਅਤੇ ਐਚਸੀ (ਚਿੱਤਰ, 5ਬੀ, ਸੀ) ਦੇ ਮੁਕਾਬਲੇ LA ਵਿੱਚ ਹਾਈਪੋਕਸੈਨਥਾਈਨ ਅਤੇ ਜ਼ੈਨਥਾਈਨ, ਪਾਈਰੂਵੇਟ, ਅਤੇ ਲੈਕਟੇਟ ਨੂੰ ਵਧਾਇਆ ਗਿਆ ਸੀ. p <0.05).ਹਾਲਾਂਕਿ, BN ਅਤੇ HC ਵਿਚਕਾਰ ਇਹਨਾਂ ਮੈਟਾਬੋਲਾਈਟਾਂ ਵਿੱਚ ਕੋਈ ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ ਅੰਤਰ ਨਹੀਂ ਮਿਲੇ ਹਨ।
BN ਅਤੇ HC ਸਮੂਹਾਂ ਦੇ ਮੁਕਾਬਲੇ LA ਸਮੂਹ ਵਿੱਚ ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ ਤੌਰ 'ਤੇ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਮੈਟਾਬੋਲਾਈਟਾਂ ਦਾ ਕੇਈਜੀਜੀ ਮਾਰਗ ਸੰਸ਼ੋਧਨ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ।ਇੱਕ ਦੋ-ਪੂਛ ਵਾਲਾ ਗਲੋਬਲਟੈਸਟ ਵਰਤਿਆ ਗਿਆ ਸੀ, ਅਤੇ p ਮੁੱਲਾਂ ਨੂੰ Holm-Bonferroni ਵਿਧੀ (ਅਡਜਸਟਡ p ≤ 0.001 ਅਤੇ ਪ੍ਰਭਾਵ ਦਾ ਆਕਾਰ > 0.01) ਵਰਤ ਕੇ ਐਡਜਸਟ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।LC-MS/MS (n = 70 ਪ੍ਰਤੀ ਸਮੂਹ) ਦੁਆਰਾ ਨਿਰਧਾਰਤ ਸੀਰਮ HC, BN, ਅਤੇ LA ਵਿੱਚ ਹਾਈਪੋਕਸੈਨਥਾਈਨ, ਜ਼ੈਨਥਾਈਨ, ਲੈਕਟੇਟ, ਪਾਈਰੂਵੇਟ, ਅਤੇ ਟ੍ਰਿਪਟੋਫ਼ਨ ਦੇ ਪੱਧਰਾਂ ਨੂੰ ਦਰਸਾਉਂਦੇ ਹੋਏ b–d ਵਾਇਲਨ ਪਲਾਟ।ਚਿੱਟੇ ਅਤੇ ਕਾਲੇ ਬਿੰਦੀਆਂ ਵਾਲੀਆਂ ਰੇਖਾਵਾਂ ਕ੍ਰਮਵਾਰ ਮੱਧ ਅਤੇ ਚੌਥਾਈ ਨੂੰ ਦਰਸਾਉਂਦੀਆਂ ਹਨ।e ਵਾਇਲਨ ਪਲਾਟ LUAD-TCGA ਡੇਟਾਸੇਟ ਵਿੱਚ ਆਮ ਫੇਫੜਿਆਂ ਦੇ ਟਿਸ਼ੂ (n = 59) ਦੇ ਮੁਕਾਬਲੇ ਫੇਫੜਿਆਂ ਦੇ ਐਡੀਨੋਕਾਰਸੀਨੋਮਾ (n = 513) ਵਿੱਚ SLC7A5 ਅਤੇ QPRT ਦਾ ਸਧਾਰਣ Log2TPM (ਪ੍ਰਤੀ ਮਿਲੀਅਨ ਪ੍ਰਤੀਲਿਪੀ) mRNA ਸਮੀਕਰਨ ਦਿਖਾ ਰਿਹਾ ਹੈ।ਚਿੱਟਾ ਬਕਸਾ ਇੰਟਰਕੁਆਰਟਾਈਲ ਰੇਂਜ ਨੂੰ ਦਰਸਾਉਂਦਾ ਹੈ, ਕੇਂਦਰ ਵਿੱਚ ਹਰੀਜੱਟਲ ਕਾਲੀ ਲਾਈਨ ਮੱਧ ਨੂੰ ਦਰਸਾਉਂਦੀ ਹੈ, ਅਤੇ ਬਕਸੇ ਤੋਂ ਫੈਲੀ ਲੰਬਕਾਰੀ ਕਾਲੀ ਲਾਈਨ 95% ਵਿਸ਼ਵਾਸ ਅੰਤਰਾਲ (CI) ਨੂੰ ਦਰਸਾਉਂਦੀ ਹੈ।f TCGA ਡੇਟਾਸੇਟ ਵਿੱਚ ਫੇਫੜਿਆਂ ਦੇ ਐਡੀਨੋਕਾਰਸੀਨੋਮਾ (n = 513) ਅਤੇ ਆਮ ਫੇਫੜੇ ਦੇ ਟਿਸ਼ੂ (n = 59) ਵਿੱਚ SLC7A5 ਅਤੇ GAPDH ਸਮੀਕਰਨ ਦਾ ਪੀਅਰਸਨ ਸਹਿ-ਸੰਬੰਧ ਪਲਾਟ।ਸਲੇਟੀ ਖੇਤਰ 95% CI ਨੂੰ ਦਰਸਾਉਂਦਾ ਹੈ।r, ਪੀਅਰਸਨ ਸਹਿ-ਸਬੰਧ ਗੁਣਾਂਕ।g LC-MS/MS ਦੁਆਰਾ ਨਿਰਧਾਰਿਤ ਗੈਰ-ਵਿਸ਼ੇਸ਼ shRNA ਨਿਯੰਤਰਣ (NC) ਅਤੇ shSLC7A5 (Sh1, Sh2) ਨਾਲ ਤਬਦੀਲ ਕੀਤੇ A549 ਸੈੱਲਾਂ ਵਿੱਚ ਸਧਾਰਣ ਸੈਲੂਲਰ ਟ੍ਰਿਪਟੋਫਨ ਪੱਧਰ।ਹਰੇਕ ਸਮੂਹ ਵਿੱਚ ਪੰਜ ਜੀਵ-ਵਿਗਿਆਨਕ ਤੌਰ 'ਤੇ ਸੁਤੰਤਰ ਨਮੂਨਿਆਂ ਦਾ ਅੰਕੜਾ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਪੇਸ਼ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਹੈ।h A549 ਸੈੱਲਾਂ (NC) ਅਤੇ SLC7A5 ਨਾਕਡਾਊਨ A549 ਸੈੱਲਾਂ (Sh1, Sh2) ਵਿੱਚ NADt (ਕੁੱਲ NAD, NAD+ ਅਤੇ NADH ਸਮੇਤ) ਦੇ ਸੈਲੂਲਰ ਪੱਧਰ।ਹਰੇਕ ਸਮੂਹ ਵਿੱਚ ਤਿੰਨ ਜੀਵ-ਵਿਗਿਆਨਕ ਤੌਰ 'ਤੇ ਸੁਤੰਤਰ ਨਮੂਨਿਆਂ ਦਾ ਅੰਕੜਾ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਪੇਸ਼ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਹੈ।i SLC7A5 ਨਾਕਡਾਉਨ ਤੋਂ ਪਹਿਲਾਂ ਅਤੇ ਬਾਅਦ ਵਿੱਚ A549 ਸੈੱਲਾਂ ਦੀ ਗਲਾਈਕੋਲੀਟਿਕ ਗਤੀਵਿਧੀ ਨੂੰ ਐਕਸਟਰਸੈਲੂਲਰ ਐਸਿਡੀਫਿਕੇਸ਼ਨ ਰੇਟ (ECAR) (n = 4 ਪ੍ਰਤੀ ਸਮੂਹ ਜੀਵ-ਵਿਗਿਆਨਕ ਤੌਰ 'ਤੇ ਸੁਤੰਤਰ ਨਮੂਨੇ) ਦੁਆਰਾ ਮਾਪਿਆ ਗਿਆ ਸੀ।2-DG,2-deoxy-D-ਗਲੂਕੋਜ਼।ਦੋ-ਪੂਛ ਵਾਲੇ ਵਿਦਿਆਰਥੀ ਦਾ ਟੀ ਟੈਸਟ (b–h) ਵਿੱਚ ਵਰਤਿਆ ਗਿਆ ਸੀ।(g–i) ਵਿੱਚ, ਤਰੁੱਟੀ ਪੱਟੀਆਂ ਮਤਲਬ ± SD ਨੂੰ ਦਰਸਾਉਂਦੀਆਂ ਹਨ, ਹਰੇਕ ਪ੍ਰਯੋਗ ਤਿੰਨ ਵਾਰ ਸੁਤੰਤਰ ਤੌਰ 'ਤੇ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ ਅਤੇ ਨਤੀਜੇ ਸਮਾਨ ਸਨ।ਸਰੋਤ ਡੇਟਾ ਸਰੋਤ ਡੇਟਾ ਫਾਈਲਾਂ ਦੇ ਰੂਪ ਵਿੱਚ ਪ੍ਰਦਾਨ ਕੀਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ।
LA ਸਮੂਹ ਵਿੱਚ ਬਦਲੇ ਹੋਏ ਟ੍ਰਿਪਟੋਫ਼ਨ ਮੈਟਾਬੋਲਿਜ਼ਮ ਦੇ ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ ਪ੍ਰਭਾਵ ਨੂੰ ਧਿਆਨ ਵਿੱਚ ਰੱਖਦੇ ਹੋਏ, ਅਸੀਂ QQQ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੇ ਹੋਏ HC, BN, ਅਤੇ LA ਸਮੂਹਾਂ ਵਿੱਚ ਸੀਰਮ ਟ੍ਰਿਪਟੋਫ਼ਨ ਦੇ ਪੱਧਰਾਂ ਦਾ ਮੁਲਾਂਕਣ ਕੀਤਾ।ਅਸੀਂ ਪਾਇਆ ਕਿ ਐਚਸੀ ਜਾਂ ਬੀਐਨ (ਪੀ <0.001, ਚਿੱਤਰ 5 ਡੀ) ਦੀ ਤੁਲਨਾ ਵਿੱਚ ਐਲਏ ਵਿੱਚ ਸੀਰਮ ਟ੍ਰਿਪਟੋਫਨ ਘਟਾਇਆ ਗਿਆ ਸੀ, ਜੋ ਕਿ ਪਿਛਲੀ ਖੋਜਾਂ ਨਾਲ ਮੇਲ ਖਾਂਦਾ ਹੈ ਕਿ ਫੇਫੜਿਆਂ ਦੇ ਕੈਂਸਰ ਵਾਲੇ ਮਰੀਜ਼ਾਂ ਵਿੱਚ ਟ੍ਰਿਪਟੋਫਨ ਦਾ ਪੱਧਰ ਕੰਟਰੋਲ ਗਰੁੱਪ 33,34 ਦੇ ਸਿਹਤਮੰਦ ਨਿਯੰਤਰਣਾਂ ਨਾਲੋਂ ਘੱਟ ਹੈ। ,35.PET/CT ਟ੍ਰੇਸਰ 11C-methyl-L-tryptophan ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੇ ਹੋਏ ਇੱਕ ਹੋਰ ਅਧਿਐਨ ਵਿੱਚ ਪਾਇਆ ਗਿਆ ਕਿ ਫੇਫੜਿਆਂ ਦੇ ਕੈਂਸਰ ਟਿਸ਼ੂ ਵਿੱਚ ਟ੍ਰਿਪਟੋਫੈਨ ਸਿਗਨਲ ਧਾਰਨ ਦਾ ਸਮਾਂ ਸਧਾਰਣ ਜਖਮਾਂ ਜਾਂ ਆਮ ਟਿਸ਼ੂ 36 ਦੇ ਮੁਕਾਬਲੇ ਕਾਫ਼ੀ ਵੱਧ ਗਿਆ ਸੀ।ਅਸੀਂ ਇਹ ਅਨੁਮਾਨ ਲਗਾਉਂਦੇ ਹਾਂ ਕਿ LA ਸੀਰਮ ਵਿੱਚ ਟ੍ਰਿਪਟੋਫ਼ਨ ਵਿੱਚ ਕਮੀ ਫੇਫੜਿਆਂ ਦੇ ਕੈਂਸਰ ਸੈੱਲਾਂ ਦੁਆਰਾ ਕਿਰਿਆਸ਼ੀਲ ਟ੍ਰਿਪਟੋਫ਼ਨ ਗ੍ਰਹਿਣ ਨੂੰ ਦਰਸਾ ਸਕਦੀ ਹੈ।
ਇਹ ਵੀ ਜਾਣਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ ਕਿ ਟ੍ਰਿਪਟੋਫੈਨ ਕੈਟਾਬੋਲਿਜ਼ਮ ਦੇ ਕਾਇਨੂਰੀਨਾਈਨ ਪਾਥਵੇਅ ਦਾ ਅੰਤਮ ਉਤਪਾਦ NAD+37,38 ਹੈ, ਜੋ ਕਿ ਗਲਾਈਕੋਲਾਈਸਿਸ 39 ਵਿੱਚ 1,3-ਬਿਸਫੋਸਫੋਗਲਾਈਸਰੇਟ ਦੇ ਨਾਲ ਗਲਾਈਸੈਰਾਲਡਹਾਈਡ-3-ਫਾਸਫੇਟ ਦੀ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਲਈ ਇੱਕ ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ ਘਟਾਓਣਾ ਹੈ।ਜਦੋਂ ਕਿ ਪਿਛਲੇ ਅਧਿਐਨਾਂ ਨੇ ਇਮਿਊਨ ਰੈਗੂਲੇਸ਼ਨ ਵਿੱਚ ਟ੍ਰਿਪਟੋਫਨ ਕੈਟਾਬੋਲਿਜ਼ਮ ਦੀ ਭੂਮਿਕਾ 'ਤੇ ਧਿਆਨ ਕੇਂਦ੍ਰਤ ਕੀਤਾ ਹੈ, ਅਸੀਂ ਮੌਜੂਦਾ ਅਧਿਐਨ ਵਿੱਚ ਦੇਖੇ ਗਏ ਟ੍ਰਿਪਟੋਫਨ ਡਿਸਰੈਗੂਲੇਸ਼ਨ ਅਤੇ ਗਲਾਈਕੋਲਾਈਟਿਕ ਮਾਰਗਾਂ ਦੇ ਵਿਚਕਾਰ ਅੰਤਰ-ਪਲੇਅ ਨੂੰ ਸਪੱਸ਼ਟ ਕਰਨ ਦੀ ਕੋਸ਼ਿਸ਼ ਕੀਤੀ।ਘੋਲ ਟਰਾਂਸਪੋਰਟਰ ਪਰਿਵਾਰ 7 ਮੈਂਬਰ 5 (SLC7A5) ਨੂੰ ਟ੍ਰਿਪਟੋਫਨ ਟ੍ਰਾਂਸਪੋਰਟਰ 43,44,45 ਵਜੋਂ ਜਾਣਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ।ਕੁਇਨੋਲਿਨਿਕ ਐਸਿਡ ਫਾਸਫੋਰੀਬੋਸਿਲਟ੍ਰਾਂਸਫੇਰੇਸ (QPRT) ਇੱਕ ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਹੈ ਜੋ ਕਿਨੂਰੀਨ ਪਾਥਵੇਅ ਦੇ ਹੇਠਾਂ ਸਥਿਤ ਹੈ ਜੋ ਕਿ ਕੁਇਨੋਲਿਨਿਕ ਐਸਿਡ ਨੂੰ NAMN46 ਵਿੱਚ ਬਦਲਦਾ ਹੈ।LUAD TCGA ਡੇਟਾਸੈਟ ਦੇ ਨਿਰੀਖਣ ਤੋਂ ਪਤਾ ਲੱਗਾ ਹੈ ਕਿ SLC7A5 ਅਤੇ QPRT ਦੋਵੇਂ ਆਮ ਟਿਸ਼ੂ (ਚਿੱਤਰ 5e) ਦੇ ਮੁਕਾਬਲੇ ਟਿਊਮਰ ਟਿਸ਼ੂ ਵਿੱਚ ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ ਤੌਰ 'ਤੇ ਅੱਪਰੇਗੂਲੇਟ ਕੀਤੇ ਗਏ ਸਨ।ਇਹ ਵਾਧਾ ਪੜਾਅ I ਅਤੇ II ਦੇ ਨਾਲ-ਨਾਲ ਫੇਫੜਿਆਂ ਦੇ ਐਡੀਨੋਕਾਰਸੀਨੋਮਾ (ਪੂਰਕ ਚਿੱਤਰ 11) ਦੇ ਪੜਾਅ III ਅਤੇ IV ਵਿੱਚ ਦੇਖਿਆ ਗਿਆ ਸੀ, ਜੋ ਕਿ ਟਿਊਮੋਰੀਜੇਨੇਸਿਸ ਨਾਲ ਜੁੜੇ ਟ੍ਰਿਪਟੋਫਨ ਮੈਟਾਬੋਲਿਜ਼ਮ ਵਿੱਚ ਸ਼ੁਰੂਆਤੀ ਵਿਘਨ ਨੂੰ ਦਰਸਾਉਂਦਾ ਹੈ।
ਇਸ ਤੋਂ ਇਲਾਵਾ, LUAD-TCGA ਡੇਟਾਸੈਟ ਨੇ ਕੈਂਸਰ ਦੇ ਮਰੀਜ਼ਾਂ ਦੇ ਨਮੂਨਿਆਂ (r = 0.45, p = 1.55E-26, ਚਿੱਤਰ 5f) ਵਿੱਚ SLC7A5 ਅਤੇ GAPDH mRNA ਸਮੀਕਰਨ ਦੇ ਵਿਚਕਾਰ ਇੱਕ ਸਕਾਰਾਤਮਕ ਸਬੰਧ ਦਿਖਾਇਆ।ਇਸਦੇ ਉਲਟ, ਆਮ ਫੇਫੜੇ ਦੇ ਟਿਸ਼ੂ (r = 0.25, p = 0.06, ਚਿੱਤਰ 5f) ਵਿੱਚ ਅਜਿਹੇ ਜੀਨ ਦਸਤਖਤਾਂ ਵਿਚਕਾਰ ਕੋਈ ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ ਸਬੰਧ ਨਹੀਂ ਪਾਇਆ ਗਿਆ।A549 ਸੈੱਲਾਂ ਵਿੱਚ SLC7A5 (ਪੂਰਕ ਚਿੱਤਰ 12) ਦੇ ਨਾਕਡਾਉਨ ਨੇ ਸੈਲੂਲਰ ਟ੍ਰਿਪਟੋਫਨ ਅਤੇ NAD(H) ਪੱਧਰਾਂ (ਚਿੱਤਰ 5g,h) ਨੂੰ ਮਹੱਤਵਪੂਰਣ ਰੂਪ ਵਿੱਚ ਘਟਾ ਦਿੱਤਾ ਹੈ, ਨਤੀਜੇ ਵਜੋਂ ਐਕਸਟਰਸੈਲੂਲਰ ਐਸਿਡੀਫਿਕੇਸ਼ਨ ਦਰ (ECAR) (ਚਿੱਤਰ 1) ਦੁਆਰਾ ਮਾਪੀ ਗਈ ਗਲਾਈਕੋਲੀਟਿਕ ਗਤੀਵਿਧੀ ਵਿੱਚ ਕਮੀ ਆਈ ਹੈ।5i)ਇਸ ਤਰ੍ਹਾਂ, ਸੀਰਮ ਅਤੇ ਵਿਟਰੋ ਖੋਜ ਵਿੱਚ ਪਾਚਕ ਤਬਦੀਲੀਆਂ ਦੇ ਆਧਾਰ 'ਤੇ, ਅਸੀਂ ਇਹ ਅਨੁਮਾਨ ਲਗਾਉਂਦੇ ਹਾਂ ਕਿ ਟ੍ਰਿਪਟੋਫਨ ਮੈਟਾਬੋਲਿਜ਼ਮ ਕਾਇਨੂਰੇਨਾਈਨ ਪਾਥਵੇਅ ਦੁਆਰਾ NAD + ਪੈਦਾ ਕਰ ਸਕਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਫੇਫੜਿਆਂ ਦੇ ਕੈਂਸਰ ਵਿੱਚ ਗਲਾਈਕੋਲਾਈਸਿਸ ਨੂੰ ਉਤਸ਼ਾਹਿਤ ਕਰਨ ਵਿੱਚ ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ ਭੂਮਿਕਾ ਨਿਭਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।
ਅਧਿਐਨਾਂ ਨੇ ਦਿਖਾਇਆ ਹੈ ਕਿ ਐਲਡੀਸੀਟੀ ਦੁਆਰਾ ਖੋਜੇ ਗਏ ਅਨਿਸ਼ਚਿਤ ਪਲਮੋਨਰੀ ਨੋਡਿਊਲਜ਼ ਦੀ ਇੱਕ ਵੱਡੀ ਗਿਣਤੀ ਵਿੱਚ ਵਾਧੂ ਟੈਸਟਾਂ ਦੀ ਲੋੜ ਹੋ ਸਕਦੀ ਹੈ ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਪੀਈਟੀ-ਸੀਟੀ, ਫੇਫੜਿਆਂ ਦੀ ਬਾਇਓਪਸੀ, ਅਤੇ ਖ਼ਤਰਨਾਕਤਾ ਦੇ ਗਲਤ-ਸਕਾਰਾਤਮਕ ਨਿਦਾਨ ਦੇ ਕਾਰਨ ਓਵਰਟ੍ਰੀਟਮੈਂਟ। 31 ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਚਿੱਤਰ 6 ਵਿੱਚ ਦਿਖਾਇਆ ਗਿਆ ਹੈ, ਸਾਡੇ ਅਧਿਐਨ ਨੇ ਸੰਭਾਵੀ ਡਾਇਗਨੌਸਟਿਕ ਮੁੱਲ ਦੇ ਨਾਲ ਸੀਰਮ ਮੈਟਾਬੋਲਾਈਟਸ ਦੇ ਇੱਕ ਪੈਨਲ ਦੀ ਪਛਾਣ ਕੀਤੀ ਜੋ ਸੀਟੀ ਦੁਆਰਾ ਖੋਜੇ ਗਏ ਪਲਮਨਰੀ ਨੋਡਿਊਲਜ਼ ਦੇ ਜੋਖਮ ਪੱਧਰੀਕਰਨ ਅਤੇ ਬਾਅਦ ਦੇ ਪ੍ਰਬੰਧਨ ਵਿੱਚ ਸੁਧਾਰ ਕਰ ਸਕਦੀ ਹੈ।
ਪਲਮੋਨਰੀ ਨੋਡਿਊਲਜ਼ ਦਾ ਮੁਲਾਂਕਣ ਘੱਟ-ਡੋਜ਼ ਕੰਪਿਊਟਿਡ ਟੋਮੋਗ੍ਰਾਫੀ (LDCT) ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਇਮੇਜਿੰਗ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾਵਾਂ ਦੇ ਨਾਲ ਕੀਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ ਜੋ ਕਿ ਸੁਭਾਵਕ ਜਾਂ ਘਾਤਕ ਕਾਰਨਾਂ ਦਾ ਸੁਝਾਅ ਦਿੰਦੇ ਹਨ।ਨੋਡਿਊਲਜ਼ ਦੇ ਅਨਿਸ਼ਚਿਤ ਨਤੀਜੇ ਅਕਸਰ ਫਾਲੋ-ਅੱਪ ਮੁਲਾਕਾਤਾਂ, ਬੇਲੋੜੀ ਦਖਲਅੰਦਾਜ਼ੀ, ਅਤੇ ਓਵਰਟ੍ਰੀਟਮੈਂਟ ਦਾ ਕਾਰਨ ਬਣ ਸਕਦੇ ਹਨ।ਡਾਇਗਨੌਸਟਿਕ ਮੁੱਲ ਦੇ ਨਾਲ ਸੀਰਮ ਮੈਟਾਬੋਲਿਕ ਕਲਾਸੀਫਾਇਰ ਨੂੰ ਸ਼ਾਮਲ ਕਰਨ ਨਾਲ ਜੋਖਮ ਮੁਲਾਂਕਣ ਅਤੇ ਪਲਮਨਰੀ ਨੋਡਿਊਲਜ਼ ਦੇ ਬਾਅਦ ਦੇ ਪ੍ਰਬੰਧਨ ਵਿੱਚ ਸੁਧਾਰ ਹੋ ਸਕਦਾ ਹੈ।ਪੀਈਟੀ ਪੋਜ਼ੀਟਰੋਨ ਐਮੀਸ਼ਨ ਟੋਮੋਗ੍ਰਾਫੀ।
ਯੂਐਸ ਐਨਐਲਐਸਟੀ ਅਧਿਐਨ ਅਤੇ ਯੂਰਪੀਅਨ ਨੈਲਸਨ ਅਧਿਐਨ ਦੇ ਅੰਕੜਿਆਂ ਤੋਂ ਪਤਾ ਲੱਗਦਾ ਹੈ ਕਿ ਘੱਟ-ਡੋਜ਼ ਕੰਪਿਊਟਿਡ ਟੋਮੋਗ੍ਰਾਫੀ (ਐਲਡੀਸੀਟੀ) ਨਾਲ ਉੱਚ-ਜੋਖਮ ਵਾਲੇ ਸਮੂਹਾਂ ਦੀ ਸਕ੍ਰੀਨਿੰਗ ਫੇਫੜਿਆਂ ਦੇ ਕੈਂਸਰ ਦੀ ਮੌਤ ਦਰ ਨੂੰ ਘਟਾ ਸਕਦੀ ਹੈ1,3।ਹਾਲਾਂਕਿ, ਐਲਡੀਸੀਟੀ ਦੁਆਰਾ ਖੋਜੇ ਗਏ ਵੱਡੀ ਗਿਣਤੀ ਵਿੱਚ ਸੰਭਾਵਿਤ ਪਲਮੋਨਰੀ ਨੋਡਿਊਲਜ਼ ਦਾ ਜੋਖਮ ਮੁਲਾਂਕਣ ਅਤੇ ਬਾਅਦ ਵਿੱਚ ਕਲੀਨਿਕਲ ਪ੍ਰਬੰਧਨ ਸਭ ਤੋਂ ਚੁਣੌਤੀਪੂਰਨ ਬਣਿਆ ਹੋਇਆ ਹੈ।ਮੁੱਖ ਟੀਚਾ ਭਰੋਸੇਯੋਗ ਬਾਇਓਮਾਰਕਰਾਂ ਨੂੰ ਸ਼ਾਮਲ ਕਰਕੇ ਮੌਜੂਦਾ LDCT-ਅਧਾਰਿਤ ਪ੍ਰੋਟੋਕੋਲ ਦੇ ਸਹੀ ਵਰਗੀਕਰਨ ਨੂੰ ਅਨੁਕੂਲ ਬਣਾਉਣਾ ਹੈ।
ਕੁਝ ਅਣੂ ਬਾਇਓਮਾਰਕਰ, ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਬਲੱਡ ਮੈਟਾਬੋਲਾਈਟਸ, ਨੂੰ ਫੇਫੜਿਆਂ ਦੇ ਕੈਂਸਰ ਦੀ ਸਿਹਤਮੰਦ ਨਿਯੰਤਰਣਾਂ ਨਾਲ ਤੁਲਨਾ ਕਰਕੇ ਪਛਾਣਿਆ ਗਿਆ ਹੈ15,17।ਮੌਜੂਦਾ ਅਧਿਐਨ ਵਿੱਚ, ਅਸੀਂ ਐਲਡੀਸੀਟੀ ਦੁਆਰਾ ਇਤਫਾਕ ਨਾਲ ਖੋਜੇ ਗਏ ਸੁਭਾਵਕ ਅਤੇ ਘਾਤਕ ਪਲਮੋਨਰੀ ਨੋਡਿਊਲ ਵਿੱਚ ਫਰਕ ਕਰਨ ਲਈ ਸੀਰਮ ਮੈਟਾਬੋਲੋਮਿਕਸ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਦੀ ਵਰਤੋਂ 'ਤੇ ਧਿਆਨ ਕੇਂਦਰਿਤ ਕੀਤਾ।ਅਸੀਂ UPLC-HRMS ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੇ ਹੋਏ ਸਿਹਤਮੰਦ ਨਿਯੰਤਰਣ (HC), ਸੁਭਾਵਕ ਫੇਫੜੇ ਦੇ ਨੋਡਿਊਲਜ਼ (BN), ਅਤੇ ਪੜਾਅ I ਫੇਫੜੇ ਦੇ ਐਡੀਨੋਕਾਰਸੀਨੋਮਾ (LA) ਨਮੂਨਿਆਂ ਦੇ ਗਲੋਬਲ ਸੀਰਮ ਮੈਟਾਬੋਲੋਮ ਦੀ ਤੁਲਨਾ ਕੀਤੀ।ਅਸੀਂ ਪਾਇਆ ਕਿ HC ਅਤੇ BN ਦੇ ਸਮਾਨ ਪਾਚਕ ਪ੍ਰੋਫਾਈਲ ਸਨ, ਜਦੋਂ ਕਿ LA ਨੇ HC ਅਤੇ BN ਦੇ ਮੁਕਾਬਲੇ ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ ਤਬਦੀਲੀਆਂ ਦਿਖਾਈਆਂ।ਅਸੀਂ ਸੀਰਮ ਮੈਟਾਬੋਲਾਈਟਸ ਦੇ ਦੋ ਸੈੱਟਾਂ ਦੀ ਪਛਾਣ ਕੀਤੀ ਜੋ LA ਨੂੰ HC ਅਤੇ BN ਤੋਂ ਵੱਖਰਾ ਕਰਦੇ ਹਨ।
ਸੁਭਾਵਕ ਅਤੇ ਘਾਤਕ ਨੋਡਿਊਲ ਲਈ ਮੌਜੂਦਾ LDCT-ਆਧਾਰਿਤ ਪਛਾਣ ਸਕੀਮ ਮੁੱਖ ਤੌਰ 'ਤੇ 30 ਦੇ ਨਾਲ ਨੋਡਿਊਲ ਦੇ ਆਕਾਰ, ਘਣਤਾ, ਰੂਪ ਵਿਗਿਆਨ ਅਤੇ ਵਿਕਾਸ ਦਰ 'ਤੇ ਆਧਾਰਿਤ ਹੈ।ਪਿਛਲੇ ਅਧਿਐਨਾਂ ਨੇ ਦਿਖਾਇਆ ਹੈ ਕਿ ਨੋਡਿਊਲ ਦਾ ਆਕਾਰ ਫੇਫੜਿਆਂ ਦੇ ਕੈਂਸਰ ਦੀ ਸੰਭਾਵਨਾ ਨਾਲ ਨੇੜਿਓਂ ਜੁੜਿਆ ਹੋਇਆ ਹੈ।ਉੱਚ-ਜੋਖਮ ਵਾਲੇ ਮਰੀਜ਼ਾਂ ਵਿੱਚ ਵੀ, ਨੋਡ <6 ਮਿਲੀਮੀਟਰ ਵਿੱਚ ਖ਼ਤਰਨਾਕਤਾ ਦਾ ਜੋਖਮ <1% ਹੈ.6 ਤੋਂ 20 ਮਿਲੀਮੀਟਰ ਦੇ ਮਾਪ ਵਾਲੇ ਨੋਡਿਊਲ ਲਈ ਖ਼ਤਰਨਾਕਤਾ ਦਾ ਜੋਖਮ 8% ਤੋਂ 64%30 ਤੱਕ ਹੁੰਦਾ ਹੈ।ਇਸ ਲਈ, ਫਲੀਸ਼ਨਰ ਸੁਸਾਇਟੀ ਰੁਟੀਨ ਸੀਟੀ ਫਾਲੋ-ਅਪ ਲਈ 6 ਮਿਲੀਮੀਟਰ ਦੇ ਕੱਟ-ਆਫ ਵਿਆਸ ਦੀ ਸਿਫ਼ਾਰਸ਼ ਕਰਦੀ ਹੈ।29 ਹਾਲਾਂਕਿ, 6 ਮਿਲੀਮੀਟਰ ਤੋਂ ਵੱਡੇ ਅਨਿਸ਼ਚਿਤ ਪਲਮਨਰੀ ਨੋਡਿਊਲਜ਼ (IPN) ਦਾ ਜੋਖਮ ਮੁਲਾਂਕਣ ਅਤੇ ਪ੍ਰਬੰਧਨ ਢੁਕਵੇਂ ਢੰਗ ਨਾਲ ਨਹੀਂ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਹੈ।ਜਮਾਂਦਰੂ ਦਿਲ ਦੀ ਬਿਮਾਰੀ ਦਾ ਵਰਤਮਾਨ ਪ੍ਰਬੰਧਨ ਆਮ ਤੌਰ 'ਤੇ ਸੀਟੀ ਨਿਗਰਾਨੀ ਦੇ ਨਾਲ ਚੌਕਸ ਉਡੀਕ 'ਤੇ ਅਧਾਰਤ ਹੁੰਦਾ ਹੈ।
ਪ੍ਰਮਾਣਿਤ ਮੈਟਾਬੋਲੋਮ ਦੇ ਆਧਾਰ 'ਤੇ, ਅਸੀਂ ਪਹਿਲੀ ਵਾਰ ਸਿਹਤਮੰਦ ਵਿਅਕਤੀਆਂ ਅਤੇ ਸੁਭਾਵਕ ਨੋਡਿਊਲ <6 ਮਿਲੀਮੀਟਰ ਵਿਚਕਾਰ ਮੈਟਾਬੋਲੋਮਿਕ ਦਸਤਖਤਾਂ ਦੇ ਓਵਰਲੈਪ ਦਾ ਪ੍ਰਦਰਸ਼ਨ ਕੀਤਾ।ਜੈਵਿਕ ਸਮਾਨਤਾ ਪਿਛਲੀਆਂ ਸੀਟੀ ਖੋਜਾਂ ਦੇ ਨਾਲ ਇਕਸਾਰ ਹੈ ਕਿ ਨੋਡਿਊਲ <6 ਮਿਲੀਮੀਟਰ ਲਈ ਖ਼ਤਰਨਾਕਤਾ ਦਾ ਜੋਖਮ ਨੋਡ ਤੋਂ ਬਿਨਾਂ ਵਿਸ਼ਿਆਂ ਲਈ ਘੱਟ ਹੈ। 30 ਇਹ ਨੋਟ ਕੀਤਾ ਜਾਣਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ ਕਿ ਸਾਡੇ ਨਤੀਜੇ ਇਹ ਵੀ ਦਰਸਾਉਂਦੇ ਹਨ ਕਿ ਸੁਭਾਵਕ ਨੋਡਿਊਲ <6 ਮਿਲੀਮੀਟਰ ਅਤੇ ≥6 ਮਿਲੀਮੀਟਰ ਉੱਚ ਹਨ। ਮੈਟਾਬੋਲੋਮਿਕ ਪ੍ਰੋਫਾਈਲਾਂ ਵਿੱਚ ਸਮਾਨਤਾ, ਇਹ ਸੁਝਾਅ ਦਿੰਦੀ ਹੈ ਕਿ ਨੋਡਿਊਲ ਦੇ ਆਕਾਰ ਦੀ ਪਰਵਾਹ ਕੀਤੇ ਬਿਨਾਂ ਸੁਭਾਵਕ ਈਟੀਓਲੋਜੀ ਦੀ ਕਾਰਜਸ਼ੀਲ ਪਰਿਭਾਸ਼ਾ ਇਕਸਾਰ ਹੈ।ਇਸ ਤਰ੍ਹਾਂ, ਆਧੁਨਿਕ ਡਾਇਗਨੌਸਟਿਕ ਸੀਰਮ ਮੈਟਾਬੋਲਾਈਟ ਪੈਨਲ ਨਿਯਮ-ਆਉਟ ਟੈਸਟ ਦੇ ਤੌਰ 'ਤੇ ਇੱਕ ਸਿੰਗਲ ਪਰਖ ਪ੍ਰਦਾਨ ਕਰ ਸਕਦੇ ਹਨ ਜਦੋਂ ਸੀਟੀ 'ਤੇ ਨੋਡਿਊਲ ਸ਼ੁਰੂ ਵਿੱਚ ਖੋਜੇ ਜਾਂਦੇ ਹਨ ਅਤੇ ਸੰਭਾਵੀ ਤੌਰ 'ਤੇ ਸੀਰੀਅਲ ਨਿਗਰਾਨੀ ਨੂੰ ਘਟਾਉਂਦੇ ਹਨ।ਉਸੇ ਸਮੇਂ, ਮੈਟਾਬੋਲਿਕ ਬਾਇਓਮਾਰਕਰਾਂ ਦੇ ਇੱਕੋ ਪੈਨਲ ਨੇ ਘਾਤਕ ਨੋਡਿਊਲ ≥6 ਮਿਲੀਮੀਟਰ ਦੇ ਆਕਾਰ ਨੂੰ ਸੁਭਾਵਕ ਨੋਡਿਊਲ ਤੋਂ ਵੱਖ ਕੀਤਾ ਅਤੇ ਸੀਟੀ ਚਿੱਤਰਾਂ 'ਤੇ ਸਮਾਨ ਆਕਾਰ ਅਤੇ ਅਸਪਸ਼ਟ ਰੂਪ ਵਿਗਿਆਨਿਕ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾਵਾਂ ਵਾਲੇ IPN ਲਈ ਸਹੀ ਪੂਰਵ-ਅਨੁਮਾਨ ਪ੍ਰਦਾਨ ਕੀਤੇ।ਇਸ ਸੀਰਮ ਮੈਟਾਬੋਲਿਜ਼ਮ ਵਰਗੀਕਰਣ ਨੇ 0.927 ਦੇ AUC ਦੇ ਨਾਲ ਨੋਡਿਊਲ ≥6 ਮਿਲੀਮੀਟਰ ਦੀ ਖ਼ਤਰਨਾਕਤਾ ਦੀ ਭਵਿੱਖਬਾਣੀ ਕਰਨ ਵਿੱਚ ਵਧੀਆ ਪ੍ਰਦਰਸ਼ਨ ਕੀਤਾ।ਇਕੱਠੇ ਕੀਤੇ ਗਏ, ਸਾਡੇ ਨਤੀਜੇ ਦਰਸਾਉਂਦੇ ਹਨ ਕਿ ਵਿਲੱਖਣ ਸੀਰਮ ਮੈਟਾਬੋਲੋਮਿਕ ਦਸਤਖਤ ਖਾਸ ਤੌਰ 'ਤੇ ਸ਼ੁਰੂਆਤੀ ਟਿਊਮਰ-ਪ੍ਰੇਰਿਤ ਪਾਚਕ ਤਬਦੀਲੀਆਂ ਨੂੰ ਦਰਸਾ ਸਕਦੇ ਹਨ ਅਤੇ ਨੋਡਿਊਲ ਆਕਾਰ ਤੋਂ ਸੁਤੰਤਰ, ਜੋਖਮ ਪੂਰਵ-ਸੂਚਕ ਵਜੋਂ ਸੰਭਾਵੀ ਮੁੱਲ ਰੱਖਦੇ ਹਨ।
ਖਾਸ ਤੌਰ 'ਤੇ, ਫੇਫੜਿਆਂ ਦੇ ਐਡੀਨੋਕਾਰਸੀਨੋਮਾ (LUAD) ਅਤੇ ਸਕੁਆਮਸ ਸੈੱਲ ਕਾਰਸੀਨੋਮਾ (LUSC) ਗੈਰ-ਛੋਟੇ ਸੈੱਲ ਫੇਫੜਿਆਂ ਦੇ ਕੈਂਸਰ (NSCLC) ਦੀਆਂ ਮੁੱਖ ਕਿਸਮਾਂ ਹਨ।ਇਹ ਦੇਖਦੇ ਹੋਏ ਕਿ LUSC ਤੰਬਾਕੂ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਨਾਲ ਮਜ਼ਬੂਤੀ ਨਾਲ ਜੁੜਿਆ ਹੋਇਆ ਹੈ47 ਅਤੇ LUAD CT ਸਕ੍ਰੀਨਿੰਗ 48 'ਤੇ ਖੋਜੇ ਗਏ ਫੇਫੜਿਆਂ ਦੇ ਨੋਡਿਊਲਜ਼ ਦਾ ਸਭ ਤੋਂ ਆਮ ਹਿਸਟੌਲੋਜੀ ਹੈ, ਸਾਡਾ ਵਰਗੀਕਰਣ ਮਾਡਲ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ ਤੌਰ 'ਤੇ ਪੜਾਅ I ਐਡੀਨੋਕਾਰਸੀਨੋਮਾ ਨਮੂਨਿਆਂ ਲਈ ਬਣਾਇਆ ਗਿਆ ਸੀ।ਵੈਂਗ ਅਤੇ ਸਹਿਕਰਮੀਆਂ ਨੇ LUAD 'ਤੇ ਵੀ ਧਿਆਨ ਕੇਂਦ੍ਰਤ ਕੀਤਾ ਅਤੇ ਤੰਦਰੁਸਤ ਵਿਅਕਤੀਆਂ ਤੋਂ ਸ਼ੁਰੂਆਤੀ ਪੜਾਅ ਦੇ ਫੇਫੜਿਆਂ ਦੇ ਕੈਂਸਰ ਨੂੰ ਵੱਖ ਕਰਨ ਲਈ ਲਿਪੀਡੋਮਿਕਸ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੇ ਹੋਏ ਨੌਂ ਲਿਪਿਡ ਦਸਤਖਤਾਂ ਦੀ ਪਛਾਣ ਕੀਤੀ।ਅਸੀਂ ਪੜਾਅ I LUSC ਦੇ 16 ਕੇਸਾਂ ਅਤੇ 74 ਸੁਭਾਵਕ ਨੋਡਿਊਲਜ਼ 'ਤੇ ਮੌਜੂਦਾ ਵਰਗੀਕਰਣ ਮਾਡਲ ਦੀ ਜਾਂਚ ਕੀਤੀ ਅਤੇ ਘੱਟ LUSC ਪੂਰਵ-ਅਨੁਮਾਨ ਸ਼ੁੱਧਤਾ (AUC 0.776) ਦੇਖੀ, ਇਹ ਸੁਝਾਅ ਦਿੱਤਾ ਕਿ LUAD ਅਤੇ LUSC ਦੇ ਆਪਣੇ ਮੈਟਾਬੋਲੋਮਿਕ ਦਸਤਖਤ ਹੋ ਸਕਦੇ ਹਨ।ਦਰਅਸਲ, LUAD ਅਤੇ LUSC ਨੂੰ ਈਟੀਓਲੋਜੀ, ਜੀਵ-ਵਿਗਿਆਨਕ ਮੂਲ ਅਤੇ ਜੈਨੇਟਿਕ ਵਿਗਾੜਾਂ 49 ਵਿੱਚ ਵੱਖਰਾ ਦਿਖਾਇਆ ਗਿਆ ਹੈ।ਇਸ ਲਈ, ਸਕ੍ਰੀਨਿੰਗ ਪ੍ਰੋਗਰਾਮਾਂ ਵਿੱਚ ਫੇਫੜਿਆਂ ਦੇ ਕੈਂਸਰ ਦੀ ਆਬਾਦੀ-ਅਧਾਰਤ ਖੋਜ ਲਈ ਸਿਖਲਾਈ ਮਾਡਲਾਂ ਵਿੱਚ ਹੋਰ ਕਿਸਮ ਦੇ ਹਿਸਟੌਲੋਜੀ ਨੂੰ ਸ਼ਾਮਲ ਕੀਤਾ ਜਾਣਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ।
ਇੱਥੇ, ਅਸੀਂ ਸਿਹਤਮੰਦ ਨਿਯੰਤਰਣਾਂ ਅਤੇ ਸੁਭਾਵਕ ਨੋਡਿਊਲਜ਼ ਦੀ ਤੁਲਨਾ ਵਿੱਚ ਫੇਫੜਿਆਂ ਦੇ ਐਡੀਨੋਕਾਰਸੀਨੋਮਾ ਵਿੱਚ ਛੇ ਸਭ ਤੋਂ ਵੱਧ ਅਕਸਰ ਬਦਲੇ ਜਾਣ ਵਾਲੇ ਮਾਰਗਾਂ ਦੀ ਪਛਾਣ ਕੀਤੀ ਹੈ।ਜ਼ੈਨਥਾਈਨ ਅਤੇ ਹਾਈਪੋਕਸੈਨਥਾਈਨ ਪਿਊਰੀਨ ਪਾਚਕ ਮਾਰਗ ਦੇ ਆਮ ਪਾਚਕ ਹਨ।ਸਾਡੇ ਨਤੀਜਿਆਂ ਦੇ ਨਾਲ ਇਕਸਾਰ, ਪਿਊਰੀਨ ਮੈਟਾਬੋਲਿਜ਼ਮ ਨਾਲ ਜੁੜੇ ਵਿਚਕਾਰਲੇ ਫੇਫੜਿਆਂ ਦੇ ਐਡੀਨੋਕਾਰਸੀਨੋਮਾ ਵਾਲੇ ਮਰੀਜ਼ਾਂ ਦੇ ਸੀਰਮ ਜਾਂ ਟਿਸ਼ੂਆਂ ਵਿੱਚ ਸਿਹਤਮੰਦ ਨਿਯੰਤਰਣਾਂ ਜਾਂ ਪ੍ਰੀ-ਇਨਵੈਸਿਵ ਪੜਾਅ 15,50 ਦੇ ਮਰੀਜ਼ਾਂ ਦੀ ਤੁਲਨਾ ਵਿੱਚ ਕਾਫ਼ੀ ਵਾਧਾ ਹੋਇਆ ਸੀ।ਐਲੀਵੇਟਿਡ ਸੀਰਮ ਜ਼ੈਨਥਾਈਨ ਅਤੇ ਹਾਈਪੋਕਸੈਨਥਾਈਨ ਦੇ ਪੱਧਰ ਤੇਜ਼ੀ ਨਾਲ ਕੈਂਸਰ ਸੈੱਲਾਂ ਦੇ ਫੈਲਣ ਦੁਆਰਾ ਲੋੜੀਂਦੇ ਐਨਾਬੋਲਿਜ਼ਮ ਨੂੰ ਦਰਸਾ ਸਕਦੇ ਹਨ।ਗਲੂਕੋਜ਼ ਮੈਟਾਬੋਲਿਜ਼ਮ ਦਾ ਅਨਿਯੰਤ੍ਰਣ ਕੈਂਸਰ ਮੈਟਾਬੋਲਿਜ਼ਮ 51 ਦਾ ਇੱਕ ਜਾਣਿਆ ਪਛਾਣਿਆ ਨਿਸ਼ਾਨ ਹੈ।ਇੱਥੇ, ਅਸੀਂ ਐਚਸੀ ਅਤੇ ਬੀਐਨ ਸਮੂਹ ਦੀ ਤੁਲਨਾ ਵਿੱਚ ਐਲਏ ਸਮੂਹ ਵਿੱਚ ਪਾਈਰੂਵੇਟ ਅਤੇ ਲੈਕਟੇਟ ਵਿੱਚ ਇੱਕ ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ ਵਾਧਾ ਦੇਖਿਆ ਹੈ, ਜੋ ਕਿ ਗੈਰ-ਛੋਟੇ ਸੈੱਲ ਫੇਫੜਿਆਂ ਦੇ ਕੈਂਸਰ (ਐਨਐਸਸੀਐਲਸੀ) ਦੇ ਮਰੀਜ਼ਾਂ ਦੇ ਸੀਰਮ ਮੈਟਾਬੋਲੋਮ ਪ੍ਰੋਫਾਈਲਾਂ ਵਿੱਚ ਗਲਾਈਕੋਲਾਈਟਿਕ ਪਾਥਵੇਅ ਅਸਧਾਰਨਤਾਵਾਂ ਦੀਆਂ ਪਿਛਲੀਆਂ ਰਿਪੋਰਟਾਂ ਨਾਲ ਮੇਲ ਖਾਂਦਾ ਹੈ। ਸਿਹਤਮੰਦ ਨਿਯੰਤਰਣ.ਨਤੀਜੇ ਇਕਸਾਰ ਹਨ 52,53.
ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ ਤੌਰ 'ਤੇ, ਅਸੀਂ ਫੇਫੜਿਆਂ ਦੇ ਐਡੀਨੋਕਾਰਸੀਨੋਮਾਸ ਦੇ ਸੀਰਮ ਵਿੱਚ ਪਾਈਰੂਵੇਟ ਅਤੇ ਟ੍ਰਿਪਟੋਫੈਨ ਮੈਟਾਬੋਲਿਜ਼ਮ ਦੇ ਵਿਚਕਾਰ ਇੱਕ ਉਲਟ ਸਬੰਧ ਦੇਖਿਆ।ਐਚਸੀ ਜਾਂ ਬੀਐਨ ਸਮੂਹ ਦੇ ਮੁਕਾਬਲੇ ਐਲਏ ਸਮੂਹ ਵਿੱਚ ਸੀਰਮ ਟ੍ਰਿਪਟੋਫਨ ਦੇ ਪੱਧਰ ਨੂੰ ਘਟਾ ਦਿੱਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।ਦਿਲਚਸਪ ਗੱਲ ਇਹ ਹੈ ਕਿ, ਇੱਕ ਸੰਭਾਵੀ ਸਮੂਹ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੇ ਹੋਏ ਇੱਕ ਪਿਛਲੇ ਵੱਡੇ ਪੱਧਰ ਦੇ ਅਧਿਐਨ ਵਿੱਚ ਪਾਇਆ ਗਿਆ ਹੈ ਕਿ ਫੇਫੜਿਆਂ ਦੇ ਕੈਂਸਰ 54 ਦੇ ਵਧੇ ਹੋਏ ਖ਼ਤਰੇ ਨਾਲ ਸੰਚਾਰ ਕਰਨ ਵਾਲੇ ਟ੍ਰਿਪਟੋਫ਼ਨ ਦੇ ਘੱਟ ਪੱਧਰ ਨਾਲ ਜੁੜੇ ਹੋਏ ਸਨ।ਟ੍ਰਿਪਟੋਫੈਨ ਇੱਕ ਜ਼ਰੂਰੀ ਅਮੀਨੋ ਐਸਿਡ ਹੈ ਜੋ ਅਸੀਂ ਪੂਰੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਭੋਜਨ ਤੋਂ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕਰਦੇ ਹਾਂ।ਅਸੀਂ ਇਹ ਸਿੱਟਾ ਕੱਢਦੇ ਹਾਂ ਕਿ ਫੇਫੜਿਆਂ ਦੇ ਐਡੀਨੋਕਾਰਸੀਨੋਮਾ ਵਿੱਚ ਸੀਰਮ ਟ੍ਰਿਪਟੋਫੈਨ ਦੀ ਕਮੀ ਇਸ ਮੈਟਾਬੋਲਾਈਟ ਦੀ ਤੇਜ਼ੀ ਨਾਲ ਕਮੀ ਨੂੰ ਦਰਸਾ ਸਕਦੀ ਹੈ।ਇਹ ਚੰਗੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਜਾਣਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ ਕਿ ਕਿਨੂਰੇਨਾਈਨ ਪਾਥਵੇਅ ਦੁਆਰਾ ਟ੍ਰਿਪਟੋਫੈਨ ਕੈਟਾਬੋਲਿਜ਼ਮ ਦਾ ਅੰਤਮ ਉਤਪਾਦ ਡੀ ਨੋਵੋ ਐਨਏਡੀ + ਸੰਸਲੇਸ਼ਣ ਦਾ ਸਰੋਤ ਹੈ।ਕਿਉਂਕਿ NAD + ਮੁੱਖ ਤੌਰ 'ਤੇ ਬਚਾਅ ਮਾਰਗ ਰਾਹੀਂ ਪੈਦਾ ਹੁੰਦਾ ਹੈ, ਸਿਹਤ ਅਤੇ ਬਿਮਾਰੀ ਵਿੱਚ ਟ੍ਰਿਪਟੋਫ਼ਨ ਮੈਟਾਬੋਲਿਜ਼ਮ ਵਿੱਚ NAD + ਦੀ ਮਹੱਤਤਾ ਨਿਰਧਾਰਤ ਕੀਤੀ ਜਾਣੀ ਬਾਕੀ ਹੈ।TCGA ਡੇਟਾਬੇਸ ਦੇ ਸਾਡੇ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਨੇ ਦਿਖਾਇਆ ਕਿ ਟ੍ਰਿਪਟੋਫਨ ਟ੍ਰਾਂਸਪੋਰਟਰ ਘੋਲ ਟ੍ਰਾਂਸਪੋਰਟਰ 7A5 (SLC7A5) ਦੀ ਸਮੀਕਰਨ ਆਮ ਨਿਯੰਤਰਣਾਂ ਦੇ ਮੁਕਾਬਲੇ ਫੇਫੜਿਆਂ ਦੇ ਐਡੀਨੋਕਾਰਸੀਨੋਮਾ ਵਿੱਚ ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ ਤੌਰ 'ਤੇ ਵਧੀ ਸੀ ਅਤੇ ਗਲਾਈਕੋਲਾਈਟਿਕ ਐਂਜ਼ਾਈਮ GAPDH ਦੇ ਪ੍ਰਗਟਾਵੇ ਨਾਲ ਸਕਾਰਾਤਮਕ ਤੌਰ 'ਤੇ ਸਬੰਧਿਤ ਸੀ।ਪਿਛਲੇ ਅਧਿਐਨਾਂ ਨੇ ਮੁੱਖ ਤੌਰ 'ਤੇ ਐਂਟੀਟਿਊਮਰ ਪ੍ਰਤੀਰੋਧੀ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਨੂੰ ਦਬਾਉਣ ਵਿੱਚ ਟ੍ਰਿਪਟੋਫਨ ਕੈਟਾਬੋਲਿਜ਼ਮ ਦੀ ਭੂਮਿਕਾ 'ਤੇ ਧਿਆਨ ਕੇਂਦਰਿਤ ਕੀਤਾ ਹੈ40,41,42।ਇੱਥੇ ਅਸੀਂ ਇਹ ਪ੍ਰਦਰਸ਼ਿਤ ਕਰਦੇ ਹਾਂ ਕਿ ਫੇਫੜਿਆਂ ਦੇ ਕੈਂਸਰ ਸੈੱਲਾਂ ਵਿੱਚ SLC7A5 ਦੇ ਨੋਕਡਾਉਨ ਦੁਆਰਾ ਟ੍ਰਿਪਟੋਫਨ ਦੇ ਗ੍ਰਹਿਣ ਨੂੰ ਰੋਕਣ ਦੇ ਨਤੀਜੇ ਵਜੋਂ ਸੈਲੂਲਰ NAD ਪੱਧਰਾਂ ਵਿੱਚ ਬਾਅਦ ਵਿੱਚ ਕਮੀ ਆਉਂਦੀ ਹੈ ਅਤੇ ਗਲਾਈਕੋਲੀਟਿਕ ਗਤੀਵਿਧੀ ਦਾ ਇੱਕ ਸਹਿਜ ਧਿਆਨ ਹੁੰਦਾ ਹੈ।ਸੰਖੇਪ ਵਿੱਚ, ਸਾਡਾ ਅਧਿਐਨ ਫੇਫੜਿਆਂ ਦੇ ਐਡੀਨੋਕਾਰਸੀਨੋਮਾ ਦੇ ਘਾਤਕ ਪਰਿਵਰਤਨ ਨਾਲ ਜੁੜੇ ਸੀਰਮ ਮੈਟਾਬੋਲਿਜ਼ਮ ਵਿੱਚ ਤਬਦੀਲੀਆਂ ਲਈ ਇੱਕ ਜੈਵਿਕ ਆਧਾਰ ਪ੍ਰਦਾਨ ਕਰਦਾ ਹੈ।
EGFR ਪਰਿਵਰਤਨ NSCLC ਵਾਲੇ ਮਰੀਜ਼ਾਂ ਵਿੱਚ ਸਭ ਤੋਂ ਆਮ ਡਰਾਈਵਰ ਪਰਿਵਰਤਨ ਹਨ।ਸਾਡੇ ਅਧਿਐਨ ਵਿੱਚ, ਅਸੀਂ ਪਾਇਆ ਕਿ EGFR ਪਰਿਵਰਤਨ (n = 41) ਵਾਲੇ ਮਰੀਜ਼ਾਂ ਵਿੱਚ ਜੰਗਲੀ-ਕਿਸਮ ਦੇ EGFR (n = 31) ਵਾਲੇ ਮਰੀਜ਼ਾਂ ਦੇ ਸਮਾਨ ਸਮੁੱਚੀ ਮੈਟਾਬੋਲੋਮਿਕ ਪ੍ਰੋਫਾਈਲ ਸਨ, ਹਾਲਾਂਕਿ ਅਸੀਂ ਐਸੀਲਕਾਰਨੀਟਾਈਨ ਦੇ ਮਰੀਜ਼ਾਂ ਵਿੱਚ ਕੁਝ EGFR ਪਰਿਵਰਤਨਸ਼ੀਲ ਮਰੀਜ਼ਾਂ ਦੇ ਸੀਰਮ ਪੱਧਰ ਵਿੱਚ ਕਮੀ ਪਾਈ ਹੈ।ਐਸੀਲਕਾਰਨੀਟਾਈਨਜ਼ ਦਾ ਸਥਾਪਿਤ ਕਾਰਜ ਐਸਿਲ ਸਮੂਹਾਂ ਨੂੰ ਸਾਇਟੋਪਲਾਜ਼ਮ ਤੋਂ ਮਾਈਟੋਕੌਂਡਰੀਅਲ ਮੈਟ੍ਰਿਕਸ ਵਿੱਚ ਲਿਜਾਣਾ ਹੈ, ਜਿਸ ਨਾਲ ਊਰਜਾ 55 ਪੈਦਾ ਕਰਨ ਲਈ ਫੈਟੀ ਐਸਿਡ ਦਾ ਆਕਸੀਕਰਨ ਹੁੰਦਾ ਹੈ।ਸਾਡੀਆਂ ਖੋਜਾਂ ਦੇ ਨਾਲ ਇਕਸਾਰ, ਇੱਕ ਤਾਜ਼ਾ ਅਧਿਐਨ ਨੇ 102 ਫੇਫੜਿਆਂ ਦੇ ਐਡੀਨੋਕਾਰਸੀਨੋਮਾ ਟਿਸ਼ੂ ਦੇ ਨਮੂਨੇ 50 ਦੇ ਗਲੋਬਲ ਮੈਟਾਬੋਲੋਮ ਦਾ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਕਰਕੇ EGFR ਮਿਊਟੈਂਟ ਅਤੇ EGFR ਜੰਗਲੀ-ਕਿਸਮ ਦੇ ਟਿਊਮਰਾਂ ਵਿਚਕਾਰ ਸਮਾਨ ਮੈਟਾਬੋਲੋਮ ਪ੍ਰੋਫਾਈਲਾਂ ਦੀ ਪਛਾਣ ਕੀਤੀ।ਦਿਲਚਸਪ ਗੱਲ ਇਹ ਹੈ ਕਿ, ਈਜੀਐਫਆਰ ਮਿਊਟੈਂਟ ਸਮੂਹ ਵਿੱਚ ਐਸੀਲਕਾਰਨੀਟਾਈਨ ਸਮੱਗਰੀ ਵੀ ਪਾਈ ਗਈ ਸੀ।ਇਸ ਲਈ, ਕੀ ਐਸੀਲਕਾਰਨੀਟਾਈਨ ਦੇ ਪੱਧਰਾਂ ਵਿੱਚ ਤਬਦੀਲੀਆਂ EGFR-ਪ੍ਰੇਰਿਤ ਪਾਚਕ ਤਬਦੀਲੀਆਂ ਨੂੰ ਦਰਸਾਉਂਦੀਆਂ ਹਨ ਅਤੇ ਅੰਡਰਲਾਈੰਗ ਅਣੂ ਮਾਰਗ ਅਗਲੇ ਅਧਿਐਨ ਦੇ ਯੋਗ ਹੋ ਸਕਦੇ ਹਨ।
ਸਿੱਟੇ ਵਜੋਂ, ਸਾਡਾ ਅਧਿਐਨ ਪਲਮਨਰੀ ਨੋਡਿਊਲਜ਼ ਦੇ ਵਿਭਿੰਨ ਨਿਦਾਨ ਲਈ ਇੱਕ ਸੀਰਮ ਮੈਟਾਬੋਲਿਕ ਵਰਗੀਫਾਇਰ ਦੀ ਸਥਾਪਨਾ ਕਰਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਇੱਕ ਵਰਕਫਲੋ ਦਾ ਪ੍ਰਸਤਾਵ ਕਰਦਾ ਹੈ ਜੋ ਜੋਖਮ ਮੁਲਾਂਕਣ ਨੂੰ ਅਨੁਕੂਲ ਬਣਾ ਸਕਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਸੀਟੀ ਸਕੈਨ ਸਕ੍ਰੀਨਿੰਗ ਦੇ ਅਧਾਰ ਤੇ ਕਲੀਨਿਕਲ ਪ੍ਰਬੰਧਨ ਦੀ ਸਹੂਲਤ ਪ੍ਰਦਾਨ ਕਰ ਸਕਦਾ ਹੈ।
ਇਸ ਅਧਿਐਨ ਨੂੰ ਸਨ ਯੈਟ-ਸੇਨ ਯੂਨੀਵਰਸਿਟੀ ਕੈਂਸਰ ਹਸਪਤਾਲ ਦੀ ਨੈਤਿਕ ਕਮੇਟੀ, ਸਨ ਯੈਟ-ਸੇਨ ਯੂਨੀਵਰਸਿਟੀ ਦੇ ਪਹਿਲੇ ਮਾਨਤਾ ਪ੍ਰਾਪਤ ਹਸਪਤਾਲ, ਅਤੇ ਜ਼ੇਂਗਜ਼ੂ ਯੂਨੀਵਰਸਿਟੀ ਕੈਂਸਰ ਹਸਪਤਾਲ ਦੀ ਨੈਤਿਕ ਕਮੇਟੀ ਦੁਆਰਾ ਪ੍ਰਵਾਨਗੀ ਦਿੱਤੀ ਗਈ ਸੀ।ਖੋਜ ਅਤੇ ਅੰਦਰੂਨੀ ਪ੍ਰਮਾਣਿਕਤਾ ਸਮੂਹਾਂ ਵਿੱਚ, ਕੈਂਸਰ ਨਿਯੰਤਰਣ ਅਤੇ ਰੋਕਥਾਮ ਵਿਭਾਗ, ਸਨ ਯੈਟ-ਸੇਨ ਯੂਨੀਵਰਸਿਟੀ ਕੈਂਸਰ ਸੈਂਟਰ, ਅਤੇ 166 ਸੁਭਾਵਕ ਨੋਡਿਊਲਜ਼ ਵਿੱਚ ਸਾਲਾਨਾ ਡਾਕਟਰੀ ਜਾਂਚਾਂ ਕਰ ਰਹੇ ਵਿਅਕਤੀਆਂ ਤੋਂ ਤੰਦਰੁਸਤ ਵਿਅਕਤੀਆਂ ਤੋਂ 174 ਸੀਰਾ ਅਤੇ ਨਰਮ ਨੋਡਿਊਲ ਤੋਂ 244 ਸੀਰਾ ਇਕੱਤਰ ਕੀਤੇ ਗਏ ਸਨ।ਸੀਰਮਪੜਾਅ I ਫੇਫੜਿਆਂ ਦੇ ਐਡੀਨੋਕਾਰਸੀਨੋਮਾ ਨੂੰ ਸਨ ਯੈਟ-ਸੇਨ ਯੂਨੀਵਰਸਿਟੀ ਕੈਂਸਰ ਸੈਂਟਰ ਤੋਂ ਇਕੱਠਾ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।ਬਾਹਰੀ ਪ੍ਰਮਾਣਿਕਤਾ ਸਮੂਹ ਵਿੱਚ, ਸਨ ਯਾਤ-ਸੇਨ ਯੂਨੀਵਰਸਿਟੀ ਦੇ ਫਸਟ ਐਫੀਲੀਏਟਿਡ ਹਸਪਤਾਲ ਤੋਂ ਸਧਾਰਣ ਨੋਡਿਊਲਜ਼ ਦੇ 48 ਕੇਸ, ਪੜਾਅ I ਫੇਫੜਿਆਂ ਦੇ ਐਡੀਨੋਕਾਰਸੀਨੋਮਾ ਦੇ 39 ਕੇਸ, ਅਤੇ ਜ਼ੇਂਗਜ਼ੂ ਕੈਂਸਰ ਹਸਪਤਾਲ ਤੋਂ ਪੜਾਅ I ਫੇਫੜਿਆਂ ਦੇ ਐਡੀਨੋਕਾਰਸੀਨੋਮਾ ਦੇ 24 ਕੇਸ ਸਨ।ਸੁਨ ਯੈਟ-ਸੇਨ ਯੂਨੀਵਰਸਿਟੀ ਕੈਂਸਰ ਸੈਂਟਰ ਨੇ ਸਥਾਪਿਤ ਮੈਟਾਬੋਲਿਕ ਵਰਗੀਫਾਇਰ (ਮਰੀਜ਼ ਦੀਆਂ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾਵਾਂ ਸਪਲੀਮੈਂਟਰੀ ਟੇਬਲ 5 ਵਿੱਚ ਦਿਖਾਈਆਂ ਗਈਆਂ ਹਨ) ਦੀ ਨਿਦਾਨ ਯੋਗਤਾ ਦੀ ਜਾਂਚ ਕਰਨ ਲਈ ਪੜਾਅ I ਸਕੁਆਮਸ ਸੈੱਲ ਫੇਫੜਿਆਂ ਦੇ ਕੈਂਸਰ ਦੇ 16 ਕੇਸ ਵੀ ਇਕੱਠੇ ਕੀਤੇ।ਖੋਜ ਸਮੂਹ ਅਤੇ ਅੰਦਰੂਨੀ ਪ੍ਰਮਾਣਿਕਤਾ ਸਮੂਹ ਦੇ ਨਮੂਨੇ ਜਨਵਰੀ 2018 ਅਤੇ ਮਈ 2020 ਦੇ ਵਿਚਕਾਰ ਇਕੱਠੇ ਕੀਤੇ ਗਏ ਸਨ। ਬਾਹਰੀ ਪ੍ਰਮਾਣਿਕਤਾ ਸਮੂਹ ਲਈ ਨਮੂਨੇ ਅਗਸਤ 2021 ਅਤੇ ਅਕਤੂਬਰ 2022 ਦੇ ਵਿਚਕਾਰ ਇਕੱਠੇ ਕੀਤੇ ਗਏ ਸਨ। ਲਿੰਗ ਪੱਖਪਾਤ ਨੂੰ ਘੱਟ ਕਰਨ ਲਈ, ਮਰਦਾਂ ਅਤੇ ਔਰਤਾਂ ਦੇ ਕੇਸਾਂ ਦੀ ਲਗਭਗ ਬਰਾਬਰ ਸੰਖਿਆ ਨਿਰਧਾਰਤ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ ਸਮੂਹਡਿਸਕਵਰੀ ਟੀਮ ਅਤੇ ਅੰਦਰੂਨੀ ਸਮੀਖਿਆ ਟੀਮ।ਭਾਗੀਦਾਰ ਲਿੰਗ ਸਵੈ-ਰਿਪੋਰਟ ਦੇ ਅਧਾਰ ਤੇ ਨਿਰਧਾਰਤ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।ਸਾਰੇ ਭਾਗੀਦਾਰਾਂ ਤੋਂ ਸੂਚਿਤ ਸਹਿਮਤੀ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ ਅਤੇ ਕੋਈ ਮੁਆਵਜ਼ਾ ਨਹੀਂ ਦਿੱਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।ਸਧਾਰਣ ਨੋਡਿਊਲ ਵਾਲੇ ਵਿਸ਼ੇ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਦੇ ਸਮੇਂ 2 ਤੋਂ 5 ਸਾਲਾਂ ਵਿੱਚ ਸਥਿਰ ਸੀਟੀ ਸਕੈਨ ਸਕੋਰ ਵਾਲੇ ਸਨ, ਬਾਹਰੀ ਪ੍ਰਮਾਣਿਕਤਾ ਨਮੂਨੇ ਤੋਂ 1 ਕੇਸ ਨੂੰ ਛੱਡ ਕੇ, ਜਿਸ ਨੂੰ ਹਿਸਟੋਪੈਥੋਲੋਜੀ ਦੁਆਰਾ ਪਹਿਲਾਂ ਤੋਂ ਇਕੱਠਾ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ ਅਤੇ ਨਿਦਾਨ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।ਪੁਰਾਣੀ ਬ੍ਰੌਨਕਾਈਟਿਸ ਦੇ ਅਪਵਾਦ ਦੇ ਨਾਲ.ਫੇਫੜਿਆਂ ਦੇ ਐਡੀਨੋਕਾਰਸੀਨੋਮਾ ਦੇ ਕੇਸਾਂ ਨੂੰ ਫੇਫੜਿਆਂ ਦੇ ਰੀਸੈਕਸ਼ਨ ਤੋਂ ਪਹਿਲਾਂ ਇਕੱਠਾ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ ਅਤੇ ਪੈਥੋਲੋਜੀਕਲ ਨਿਦਾਨ ਦੁਆਰਾ ਪੁਸ਼ਟੀ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ।ਤੇਜ਼ ਖੂਨ ਦੇ ਨਮੂਨੇ ਬਿਨਾਂ ਕਿਸੇ ਐਂਟੀਕੋਆਗੂਲੈਂਟਸ ਦੇ ਸੀਰਮ ਵੱਖ ਕਰਨ ਵਾਲੀਆਂ ਟਿਊਬਾਂ ਵਿੱਚ ਇਕੱਠੇ ਕੀਤੇ ਗਏ ਸਨ।ਖੂਨ ਦੇ ਨਮੂਨੇ ਕਮਰੇ ਦੇ ਤਾਪਮਾਨ 'ਤੇ 1 ਘੰਟੇ ਲਈ ਜੰਮੇ ਹੋਏ ਸਨ ਅਤੇ ਫਿਰ ਸੀਰਮ ਸੁਪਰਨੇਟੈਂਟ ਨੂੰ ਇਕੱਠਾ ਕਰਨ ਲਈ 4°C 'ਤੇ 10 ਮਿੰਟ ਲਈ 2851 × g 'ਤੇ ਸੈਂਟਰਿਫਿਊਜ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।ਮੈਟਾਬੋਲਾਈਟ ਕੱਢਣ ਤੱਕ ਸੀਰਮ ਅਲੀਕੋਟਸ -80 ° C 'ਤੇ ਫ੍ਰੀਜ਼ ਕੀਤੇ ਗਏ ਸਨ।ਸਨ ਯੈਟ-ਸੇਨ ਯੂਨੀਵਰਸਿਟੀ ਕੈਂਸਰ ਸੈਂਟਰ ਦੇ ਕੈਂਸਰ ਰੋਕਥਾਮ ਅਤੇ ਮੈਡੀਕਲ ਜਾਂਚ ਵਿਭਾਗ ਨੇ 100 ਸਿਹਤਮੰਦ ਦਾਨੀਆਂ ਤੋਂ ਸੀਰਮ ਦਾ ਇੱਕ ਪੂਲ ਇਕੱਠਾ ਕੀਤਾ, ਜਿਸ ਵਿੱਚ 40 ਤੋਂ 55 ਸਾਲ ਦੀ ਉਮਰ ਦੇ ਮਰਦ ਅਤੇ ਔਰਤਾਂ ਦੀ ਬਰਾਬਰ ਗਿਣਤੀ ਸ਼ਾਮਲ ਹੈ।ਹਰੇਕ ਦਾਨੀ ਦੇ ਨਮੂਨੇ ਦੀ ਬਰਾਬਰ ਮਾਤਰਾ ਨੂੰ ਮਿਲਾਇਆ ਗਿਆ ਸੀ, ਨਤੀਜੇ ਵਜੋਂ ਪੂਲ ਨੂੰ ਵੱਖ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ ਅਤੇ -80 ° C 'ਤੇ ਸਟੋਰ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।ਸੀਰਮ ਮਿਸ਼ਰਣ ਨੂੰ ਗੁਣਵੱਤਾ ਨਿਯੰਤਰਣ ਅਤੇ ਡੇਟਾ ਮਾਨਕੀਕਰਨ ਲਈ ਸੰਦਰਭ ਸਮੱਗਰੀ ਵਜੋਂ ਵਰਤਿਆ ਗਿਆ ਸੀ।
ਸੰਦਰਭ ਸੀਰਮ ਅਤੇ ਟੈਸਟ ਦੇ ਨਮੂਨਿਆਂ ਨੂੰ ਪਿਘਲਾ ਦਿੱਤਾ ਗਿਆ ਸੀ ਅਤੇ ਇੱਕ ਸੰਯੁਕਤ ਐਕਸਟਰੈਕਸ਼ਨ ਵਿਧੀ (MTBE/ਮੇਥੇਨੌਲ/ਪਾਣੀ) 56 ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਮੈਟਾਬੋਲਾਈਟਾਂ ਨੂੰ ਕੱਢਿਆ ਗਿਆ ਸੀ।ਸੰਖੇਪ ਰੂਪ ਵਿੱਚ, 50 μl ਸੀਰਮ ਨੂੰ 225 μl ਆਈਸ-ਕੋਲਡ ਮਿਥੇਨੌਲ ਅਤੇ 750 μl ਆਈਸ-ਕੋਲਡ ਮਿਥਾਇਲ ਟੈਰਟ-ਬਿਊਟਿਲ ਈਥਰ (MTBE) ਨਾਲ ਮਿਲਾਇਆ ਗਿਆ ਸੀ।ਮਿਸ਼ਰਣ ਨੂੰ ਹਿਲਾਓ ਅਤੇ 1 ਘੰਟੇ ਲਈ ਬਰਫ਼ 'ਤੇ ਪਕਾਓ।ਫਿਰ ਨਮੂਨੇ ਮਿਕਸ ਕੀਤੇ ਗਏ ਸਨ ਅਤੇ 188 μl MS-ਗਰੇਡ ਪਾਣੀ ਦੇ ਨਾਲ ਮਿਲਾਇਆ ਗਿਆ ਸੀ ਜਿਸ ਵਿੱਚ ਅੰਦਰੂਨੀ ਮਾਪਦੰਡ (13C-ਲੈਕਟੇਟ, 13C3-ਪਾਇਰੂਵੇਟ, 13C-ਮੈਥੀਓਨਾਈਨ, ਅਤੇ 13C6-ਆਈਸੋਲੀਯੂਸੀਨ, ਕੈਮਬ੍ਰਿਜ ਆਈਸੋਟੋਪ ਲੈਬਾਰਟਰੀਆਂ ਤੋਂ ਖਰੀਦੇ ਗਏ ਸਨ)।ਮਿਸ਼ਰਣ ਨੂੰ ਫਿਰ 4 °C 'ਤੇ 10 ਮਿੰਟ ਲਈ 15,000 × g 'ਤੇ ਕੇਂਦਰਿਤ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ, ਅਤੇ ਹੇਠਲੇ ਪੜਾਅ ਨੂੰ ਸਕਾਰਾਤਮਕ ਅਤੇ ਨਕਾਰਾਤਮਕ ਮੋਡਾਂ ਵਿੱਚ LC-MS ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਲਈ ਦੋ ਟਿਊਬਾਂ (ਹਰੇਕ 125 μL) ਵਿੱਚ ਤਬਦੀਲ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।ਅੰਤ ਵਿੱਚ, ਨਮੂਨੇ ਨੂੰ ਇੱਕ ਹਾਈ-ਸਪੀਡ ਵੈਕਿਊਮ ਕੰਸੈਂਟਰੇਟਰ ਵਿੱਚ ਖੁਸ਼ਕਤਾ ਲਈ ਭਾਫ਼ ਬਣਾਇਆ ਗਿਆ ਸੀ।
ਸੁੱਕੀਆਂ ਮੈਟਾਬੋਲਾਈਟਾਂ ਨੂੰ 80% ਐਸੀਟੋਨਿਟ੍ਰਾਇਲ ਦੇ 120 μl ਵਿੱਚ ਪੁਨਰਗਠਨ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ, 5 ਮਿੰਟ ਲਈ ਵੋਰਟੈਕਸ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ, ਅਤੇ 4 ਡਿਗਰੀ ਸੈਲਸੀਅਸ 'ਤੇ 10 ਮਿੰਟ ਲਈ 15,000 × g 'ਤੇ ਕੇਂਦਰਿਤ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।ਮੈਟਾਬੋਲੋਮਿਕਸ ਅਧਿਐਨਾਂ ਲਈ ਸੂਪਰਨੇਟੈਂਟਾਂ ਨੂੰ ਮਾਈਕ੍ਰੋਇਨਸਰਟਸ ਦੇ ਨਾਲ ਅੰਬਰ ਗਲਾਸ ਦੀਆਂ ਸ਼ੀਸ਼ੀਆਂ ਵਿੱਚ ਤਬਦੀਲ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।ਇੱਕ ਅਲਟਰਾ-ਪ੍ਰਦਰਸ਼ਨ ਤਰਲ ਕ੍ਰੋਮੈਟੋਗ੍ਰਾਫੀ-ਹਾਈ-ਰੈਜ਼ੋਲਿਊਸ਼ਨ ਮਾਸ ਸਪੈਕਟ੍ਰੋਮੈਟਰੀ (UPLC-HRMS) ਪਲੇਟਫਾਰਮ 'ਤੇ ਅਣ-ਨਿਸ਼ਾਨਾਤਮਕ ਮੈਟਾਬੋਲੋਮਿਕਸ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ।ਮੈਟਾਬੋਲਾਈਟਸ ਨੂੰ ਇੱਕ Dionex ਅਲਟੀਮੇਟ 3000 UPLC ਸਿਸਟਮ ਅਤੇ ਇੱਕ ACQUITY BEH Amide ਕਾਲਮ (2.1 × 100 mm, 1.7 μm, ਵਾਟਰਸ) ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਵੱਖ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।ਸਕਾਰਾਤਮਕ ਆਇਨ ਮੋਡ ਵਿੱਚ, ਮੋਬਾਈਲ ਪੜਾਅ 95% (A) ਅਤੇ 50% ਐਸੀਟੋਨਿਟ੍ਰਾਇਲ (ਬੀ) ਸਨ, ਹਰੇਕ ਵਿੱਚ 10 mmol/L ਅਮੋਨੀਅਮ ਐਸੀਟੇਟ ਅਤੇ 0.1% ਫਾਰਮਿਕ ਐਸਿਡ ਹੁੰਦਾ ਹੈ।ਨਕਾਰਾਤਮਕ ਮੋਡ ਵਿੱਚ, ਮੋਬਾਈਲ ਪੜਾਅ A ਅਤੇ B ਵਿੱਚ ਕ੍ਰਮਵਾਰ 95% ਅਤੇ 50% ਐਸੀਟੋਨਾਈਟ੍ਰਾਈਲ ਸ਼ਾਮਲ ਹਨ, ਦੋਵਾਂ ਪੜਾਵਾਂ ਵਿੱਚ 10 mmol/L ਅਮੋਨੀਅਮ ਐਸੀਟੇਟ, pH = 9। ਗਰੇਡੀਐਂਟ ਪ੍ਰੋਗਰਾਮ ਇਸ ਤਰ੍ਹਾਂ ਸੀ: 0-0.5 ਮਿੰਟ, 2% B;0.5–12 ਮਿੰਟ, 2–50% ਬੀ;12–14 ਮਿੰਟ, 50–98% ਬੀ;14–16 ਮਿੰਟ, 98% ਬੀ;16-16.1.ਮਿੰਟ, 98 –2% ਬੀ;16.1–20 ਮਿੰਟ, 2% B. ਕਾਲਮ ਨੂੰ 40°C ਅਤੇ ਨਮੂਨੇ ਨੂੰ ਆਟੋਸੈਂਪਲਰ ਵਿੱਚ 10°C 'ਤੇ ਰੱਖਿਆ ਗਿਆ ਸੀ।ਵਹਾਅ ਦੀ ਦਰ 0.3 ਮਿਲੀਲੀਟਰ / ਮਿੰਟ ਸੀ, ਟੀਕੇ ਦੀ ਮਾਤਰਾ 3 μl ਸੀ।ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਸਪ੍ਰੇ ਆਇਓਨਾਈਜ਼ੇਸ਼ਨ (ESI) ਸਰੋਤ ਵਾਲਾ ਇੱਕ Q-ਐਕਸਐਕਟਿਵ ਔਰਬਿਟਰੈਪ ਮਾਸ ਸਪੈਕਟਰੋਮੀਟਰ (ਥਰਮੋ ਫਿਸ਼ਰ ਸਾਇੰਟਿਫਿਕ) ਪੂਰੇ ਸਕੈਨ ਮੋਡ ਵਿੱਚ ਚਲਾਇਆ ਗਿਆ ਸੀ ਅਤੇ ਵੱਡੀ ਮਾਤਰਾ ਵਿੱਚ ਡੇਟਾ ਇਕੱਠਾ ਕਰਨ ਲਈ ddMS2 ਨਿਗਰਾਨੀ ਮੋਡ ਦੇ ਨਾਲ ਜੋੜਿਆ ਗਿਆ ਸੀ।MS ਪੈਰਾਮੀਟਰ ਇਸ ਤਰ੍ਹਾਂ ਸੈੱਟ ਕੀਤੇ ਗਏ ਸਨ: ਸਪਰੇਅ ਵੋਲਟੇਜ +3.8 kV/- 3.2 kV, ਕੇਸ਼ੀਲ ਤਾਪਮਾਨ 320°C, ਸ਼ੀਲਡਿੰਗ ਗੈਸ 40 arb, ਸਹਾਇਕ ਗੈਸ 10 arb, ਪ੍ਰੋਬ ਹੀਟਰ ਦਾ ਤਾਪਮਾਨ 350°C, ਸਕੈਨਿੰਗ ਰੇਂਜ 70–1050 m/h, ਮਤਾ।70 000. ਐਕਸਕੈਲੀਬਰ 4.1 (ਥਰਮੋ ਫਿਸ਼ਰ ਸਾਇੰਟਿਫਿਕ) ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਡੇਟਾ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।
ਡਾਟਾ ਗੁਣਵੱਤਾ ਦਾ ਮੁਲਾਂਕਣ ਕਰਨ ਲਈ, ਹਰੇਕ ਨਮੂਨੇ ਤੋਂ ਸੁਪਰਨੇਟੈਂਟ ਦੇ 10 μL ਐਲੀਕੋਟਸ ਨੂੰ ਹਟਾ ਕੇ ਪੂਲਡ ਕੁਆਲਿਟੀ ਕੰਟਰੋਲ (QC) ਨਮੂਨੇ ਤਿਆਰ ਕੀਤੇ ਗਏ ਸਨ।UPLC-MS ਸਿਸਟਮ ਦੀ ਸਥਿਰਤਾ ਦਾ ਮੁਲਾਂਕਣ ਕਰਨ ਲਈ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣਾਤਮਕ ਕ੍ਰਮ ਦੀ ਸ਼ੁਰੂਆਤ ਵਿੱਚ ਛੇ ਕੁਆਲਿਟੀ ਕੰਟਰੋਲ ਸੈਂਪਲ ਇੰਜੈਕਸ਼ਨਾਂ ਦਾ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।ਗੁਣਵੱਤਾ ਨਿਯੰਤਰਣ ਦੇ ਨਮੂਨੇ ਫਿਰ ਸਮੇਂ-ਸਮੇਂ 'ਤੇ ਬੈਚ ਵਿੱਚ ਪੇਸ਼ ਕੀਤੇ ਜਾਂਦੇ ਹਨ।ਇਸ ਅਧਿਐਨ ਵਿੱਚ ਸੀਰਮ ਦੇ ਨਮੂਨਿਆਂ ਦੇ ਸਾਰੇ 11 ਬੈਚਾਂ ਦਾ LC-MS ਦੁਆਰਾ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।ਕੱਢਣ ਦੀ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਦੀ ਨਿਗਰਾਨੀ ਕਰਨ ਅਤੇ ਬੈਚ-ਟੂ-ਬੈਚ ਪ੍ਰਭਾਵਾਂ ਨੂੰ ਅਨੁਕੂਲ ਕਰਨ ਲਈ 100 ਸਿਹਤਮੰਦ ਦਾਨੀਆਂ ਤੋਂ ਇੱਕ ਸੀਰਮ ਪੂਲ ਮਿਸ਼ਰਣ ਦੇ ਅਲੀਕੋਟਸ ਨੂੰ ਸੰਬੰਧਿਤ ਬੈਚਾਂ ਵਿੱਚ ਹਵਾਲਾ ਸਮੱਗਰੀ ਵਜੋਂ ਵਰਤਿਆ ਗਿਆ ਸੀ।ਸਨ ਯੈਟ-ਸੇਨ ਯੂਨੀਵਰਸਿਟੀ ਦੇ ਮੈਟਾਬੋਲੋਮਿਕਸ ਸੈਂਟਰ ਵਿੱਚ ਖੋਜ ਸਮੂਹ, ਅੰਦਰੂਨੀ ਪ੍ਰਮਾਣਿਕਤਾ ਸਮੂਹ, ਅਤੇ ਬਾਹਰੀ ਪ੍ਰਮਾਣਿਕਤਾ ਸਮੂਹ ਦਾ ਅਣ-ਨਿਸ਼ਾਨਾਤਮਕ ਮੈਟਾਬੋਲੋਮਿਕਸ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।ਗੁਆਂਗਡੋਂਗ ਯੂਨੀਵਰਸਿਟੀ ਆਫ ਟੈਕਨਾਲੋਜੀ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਅਤੇ ਟੈਸਟਿੰਗ ਸੈਂਟਰ ਦੀ ਬਾਹਰੀ ਪ੍ਰਯੋਗਸ਼ਾਲਾ ਨੇ ਵੀ ਕਲਾਸੀਫਾਇਰ ਮਾਡਲ ਦੀ ਕਾਰਗੁਜ਼ਾਰੀ ਦੀ ਜਾਂਚ ਕਰਨ ਲਈ ਬਾਹਰੀ ਸਮੂਹ ਦੇ 40 ਨਮੂਨਿਆਂ ਦਾ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਕੀਤਾ।
ਕੱਢਣ ਅਤੇ ਪੁਨਰਗਠਨ ਤੋਂ ਬਾਅਦ, ਮਲਟੀਪਲ ਰਿਐਕਸ਼ਨ ਨਿਗਰਾਨੀ (MRM) ਮੋਡ ਵਿੱਚ ਇੱਕ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਸਪ੍ਰੇ ਆਇਓਨਾਈਜ਼ੇਸ਼ਨ (ESI) ਸਰੋਤ ਦੇ ਨਾਲ ਅਤਿ-ਉੱਚ ਪ੍ਰਦਰਸ਼ਨ ਤਰਲ ਕ੍ਰੋਮੈਟੋਗ੍ਰਾਫੀ-ਟੈਂਡਮ ਮਾਸ ਸਪੈਕਟਰੋਮੈਟਰੀ (Agilent 6495 ਟ੍ਰਿਪਲ ਕਵਾਡ੍ਰਪੋਲ) ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਸੀਰਮ ਮੈਟਾਬੋਲਾਈਟਾਂ ਦੀ ਸੰਪੂਰਨ ਮਾਤਰਾ ਨੂੰ ਮਾਪਿਆ ਗਿਆ ਸੀ।ਮੈਟਾਬੋਲਾਈਟਸ ਨੂੰ ਵੱਖ ਕਰਨ ਲਈ ਇੱਕ ACQUITY BEH Amide ਕਾਲਮ (2.1 × 100 mm, 1.7 μm, ਵਾਟਰਸ) ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ।ਮੋਬਾਈਲ ਪੜਾਅ ਵਿੱਚ 10 mmol/L ਅਮੋਨੀਅਮ ਐਸੀਟੇਟ ਅਤੇ 0.1% ਅਮੋਨੀਆ ਘੋਲ ਦੇ ਨਾਲ 90% (A) ਅਤੇ 5% ਐਸੀਟੋਨਿਟ੍ਰਾਇਲ (ਬੀ) ਸ਼ਾਮਲ ਹਨ।ਗਰੇਡੀਐਂਟ ਪ੍ਰੋਗਰਾਮ ਇਸ ਤਰ੍ਹਾਂ ਸੀ: 0-1.5 ਮਿੰਟ, 0% ਬੀ;1.5–6.5 ਮਿੰਟ, 0–15% ਬੀ;6.5–8 ਮਿੰਟ, 15% ਬੀ;8–8.5 ਮਿੰਟ, 15%–0% ਬੀ;8.5–11.5 ਮਿੰਟ, 0% ਬੀ.ਆਟੋਸੈਂਪਲਰ ਵਿੱਚ ਕਾਲਮ ਨੂੰ 40 ° C ਅਤੇ ਨਮੂਨੇ ਨੂੰ 10 ° C ਤੇ ਬਣਾਈ ਰੱਖਿਆ ਗਿਆ ਸੀ।ਵਹਾਅ ਦੀ ਦਰ 0.3 mL/min ਸੀ ਅਤੇ ਇੰਜੈਕਸ਼ਨ ਵਾਲੀਅਮ 1 μL ਸੀ।MS ਪੈਰਾਮੀਟਰ ਇਸ ਤਰ੍ਹਾਂ ਸੈੱਟ ਕੀਤੇ ਗਏ ਸਨ: ਕੇਸ਼ੀਲ ਵੋਲਟੇਜ ±3.5 kV, ਨੈਬੂਲਾਈਜ਼ਰ ਪ੍ਰੈਸ਼ਰ 35 psi, ਸ਼ੀਥ ਗੈਸ ਦਾ ਪ੍ਰਵਾਹ 12 L/min, ਸ਼ੀਥ ਗੈਸ ਦਾ ਤਾਪਮਾਨ 350°C, ਸੁਕਾਉਣ ਵਾਲੀ ਗੈਸ ਦਾ ਤਾਪਮਾਨ 250°C, ਅਤੇ ਸੁਕਾਉਣ ਵਾਲੀ ਗੈਸ ਦਾ ਪ੍ਰਵਾਹ 14 l/min।ਟ੍ਰਿਪਟੋਫੈਨ, ਪਾਈਰੂਵੇਟ, ਲੈਕਟੇਟ, ਹਾਈਪੋਕਸੈਨਥਾਈਨ ਅਤੇ ਜ਼ੈਨਥਾਈਨ ਦੇ ਐਮਆਰਐਮ ਪਰਿਵਰਤਨ 205.0–187.9, 87.0–43.4, 89.0–43.3, 135.0–92.3 ਅਤੇ 151.0–107 ਸਨ।ਕ੍ਰਮਵਾਰ 9.ਮਾਸ ਹੰਟਰ ਬੀ.07.00 (ਐਜੀਲੈਂਟ ਟੈਕਨਾਲੋਜੀ) ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਡਾਟਾ ਇਕੱਠਾ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।ਸੀਰਮ ਦੇ ਨਮੂਨਿਆਂ ਲਈ, ਟ੍ਰਿਪਟੋਫੈਨ, ਪਾਈਰੂਵੇਟ, ਲੈਕਟੇਟ, ਹਾਈਪੋਕਸੈਨਥਾਈਨ, ਅਤੇ ਜ਼ੈਨਥਾਈਨ ਨੂੰ ਮਿਆਰੀ ਮਿਸ਼ਰਣ ਹੱਲਾਂ ਦੇ ਕੈਲੀਬ੍ਰੇਸ਼ਨ ਕਰਵ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਮਾਪਿਆ ਗਿਆ ਸੀ।ਸੈੱਲ ਦੇ ਨਮੂਨਿਆਂ ਲਈ, ਟ੍ਰਿਪਟੋਫ਼ਨ ਸਮੱਗਰੀ ਨੂੰ ਅੰਦਰੂਨੀ ਮਿਆਰ ਅਤੇ ਸੈੱਲ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਪੁੰਜ ਵਿੱਚ ਸਧਾਰਣ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।
ਕੰਪਾਉਂਡ ਡਿਸਕਵਰੀ 3.1 ਅਤੇ ਟਰੇਸਫਾਈਂਡਰ 4.0 (ਥਰਮੋ ਫਿਸ਼ਰ ਸਾਇੰਟਿਫਿਕ) ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਪੀਕ ਐਕਸਟਰੈਕਸ਼ਨ (m/z ਅਤੇ ਧਾਰਨ ਸਮਾਂ (RT)) ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।ਬੈਚਾਂ ਵਿਚਕਾਰ ਸੰਭਾਵੀ ਅੰਤਰਾਂ ਨੂੰ ਖਤਮ ਕਰਨ ਲਈ, ਟੈਸਟ ਦੇ ਨਮੂਨੇ ਦੀ ਹਰੇਕ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾ ਸਿਖਰ ਨੂੰ ਉਸੇ ਬੈਚ ਤੋਂ ਸੰਦਰਭ ਸਮੱਗਰੀ ਦੀ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾ ਦੇ ਸਿਖਰ ਦੁਆਰਾ ਵੰਡਿਆ ਗਿਆ ਸੀ ਤਾਂ ਜੋ ਸੰਬੰਧਿਤ ਭਰਪੂਰਤਾ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕੀਤੀ ਜਾ ਸਕੇ।ਮਾਨਕੀਕਰਨ ਤੋਂ ਪਹਿਲਾਂ ਅਤੇ ਬਾਅਦ ਵਿੱਚ ਅੰਦਰੂਨੀ ਮਾਪਦੰਡਾਂ ਦੇ ਅਨੁਸਾਰੀ ਮਿਆਰੀ ਵਿਵਹਾਰ ਪੂਰਕ ਸਾਰਣੀ 6 ਵਿੱਚ ਦਰਸਾਏ ਗਏ ਹਨ। ਦੋ ਸਮੂਹਾਂ ਵਿੱਚ ਅੰਤਰ ਗਲਤ ਖੋਜ ਦਰ (FDR<0.05, ਵਿਲਕੋਕਸਨ ਸਾਈਨਡ ਰੈਂਕ ਟੈਸਟ) ਅਤੇ ਫੋਲਡ ਬਦਲਾਅ (>1.2 ਜਾਂ <0.83) ਦੁਆਰਾ ਦਰਸਾਏ ਗਏ ਸਨ।ਐਕਸਟਰੈਕਟ ਕੀਤੀਆਂ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾਵਾਂ ਦਾ ਕੱਚਾ ਐਮਐਸ ਡੇਟਾ ਅਤੇ ਸੰਦਰਭ ਸੀਰਮ-ਸਹੀ ਐਮਐਸ ਡੇਟਾ ਕ੍ਰਮਵਾਰ ਸਪਲੀਮੈਂਟਰੀ ਡੇਟਾ 1 ਅਤੇ ਸਪਲੀਮੈਂਟਰੀ ਡੇਟਾ 2 ਵਿੱਚ ਦਿਖਾਇਆ ਗਿਆ ਹੈ।ਪੀਕ ਐਨੋਟੇਸ਼ਨ ਪਛਾਣ ਦੇ ਚਾਰ ਪਰਿਭਾਸ਼ਿਤ ਪੱਧਰਾਂ ਦੇ ਆਧਾਰ 'ਤੇ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ, ਜਿਸ ਵਿੱਚ ਪਛਾਣੇ ਗਏ ਮੈਟਾਬੋਲਾਈਟਸ, ਪਿਊਟੇਟਿਵ ਤੌਰ 'ਤੇ ਐਨੋਟੇਟਿਡ ਮਿਸ਼ਰਣ, ਪੁਟੇਟਿਵ ਤੌਰ 'ਤੇ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾ ਵਾਲੇ ਮਿਸ਼ਰਿਤ ਕਲਾਸਾਂ, ਅਤੇ ਅਣਜਾਣ ਮਿਸ਼ਰਣ 22 ਸ਼ਾਮਲ ਹਨ।ਕੰਪਾਉਂਡ ਡਿਸਕਵਰੀ 3.1 (mzCloud, HMDB, Chemspider) ਵਿੱਚ ਡਾਟਾਬੇਸ ਖੋਜਾਂ ਦੇ ਆਧਾਰ 'ਤੇ, MS/MS ਨਾਲ ਮੇਲ ਖਾਂਦਾ ਪ੍ਰਮਾਣਿਤ ਮਿਆਰਾਂ ਜਾਂ mzCloud (ਸਕੋਰ > 85) ਜਾਂ Chemspider ਵਿੱਚ ਸਟੀਕ ਮੈਚ ਐਨੋਟੇਸ਼ਨਾਂ ਵਾਲੇ ਜੈਵਿਕ ਮਿਸ਼ਰਣਾਂ ਨੂੰ ਅੰਤ ਵਿੱਚ ਡਿਫਰੈਂਸ਼ੀਅਲ ਮੈਟਾਬੋਲੋਮ ਦੇ ਵਿਚਕਾਰ ਵਿਚਕਾਰਲੇ ਵਜੋਂ ਚੁਣਿਆ ਗਿਆ ਸੀ।ਹਰੇਕ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾ ਲਈ ਪੀਕ ਐਨੋਟੇਸ਼ਨਾਂ ਨੂੰ ਸਪਲੀਮੈਂਟਰੀ ਡੇਟਾ 3 ਵਿੱਚ ਸ਼ਾਮਲ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਹੈ। MetaboAnalyst 5.0 ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਜੋੜ-ਸਧਾਰਨ ਮੈਟਾਬੋਲਾਈਟ ਭਰਪੂਰਤਾ ਦੇ ਅਨਿੱਖੜਵੇਂ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਲਈ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ।MetaboAnalyst 5.0 ਨੇ ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ ਤੌਰ 'ਤੇ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਮੈਟਾਬੋਲਾਈਟਾਂ ਦੇ ਆਧਾਰ 'ਤੇ ਕੇਈਜੀਜੀ ਪਾਥਵੇਅ ਸੰਸ਼ੋਧਨ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਦਾ ਵੀ ਮੁਲਾਂਕਣ ਕੀਤਾ।ਪ੍ਰਿੰਸੀਪਲ ਕੰਪੋਨੈਂਟ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ (ਪੀਸੀਏ) ਅਤੇ ਅੰਸ਼ਕ ਘੱਟੋ-ਘੱਟ ਵਰਗ ਵਿਤਕਰਾ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ (PLS-DA) ਦਾ ਸਟੈਕ ਸਧਾਰਣਕਰਨ ਅਤੇ ਆਟੋਸਕੇਲਿੰਗ ਦੇ ਨਾਲ ਰੋਪਲਸ ਸੌਫਟਵੇਅਰ ਪੈਕੇਜ (v.1.26.4) ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।ਨੋਡਿਊਲ ਖ਼ਤਰਨਾਕਤਾ ਦੀ ਭਵਿੱਖਬਾਣੀ ਕਰਨ ਲਈ ਅਨੁਕੂਲ ਮੈਟਾਬੋਲਾਈਟ ਬਾਇਓਮਾਰਕਰ ਮਾਡਲ ਘੱਟੋ-ਘੱਟ ਸੰਕੁਚਨ ਅਤੇ ਚੋਣ ਆਪਰੇਟਰ (LASSO, R ਪੈਕੇਜ v.4.1-3) ਦੇ ਨਾਲ ਬਾਈਨਰੀ ਲੌਜਿਸਟਿਕ ਰਿਗਰੈਸ਼ਨ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਤਿਆਰ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।ਖੋਜ ਅਤੇ ਪ੍ਰਮਾਣਿਕਤਾ ਸੈੱਟਾਂ ਵਿੱਚ ਵਿਤਕਰੇ ਵਾਲੇ ਮਾਡਲ ਦੀ ਕਾਰਗੁਜ਼ਾਰੀ ਨੂੰ ਪੀਆਰਓਸੀ ਪੈਕੇਜ (v.1.18.0.) ਦੇ ਅਨੁਸਾਰ ROC ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਦੇ ਅਧਾਰ ਤੇ AUC ਦਾ ਅਨੁਮਾਨ ਲਗਾਉਣ ਦੁਆਰਾ ਦਰਸਾਇਆ ਗਿਆ ਸੀ।ਸਰਵੋਤਮ ਸੰਭਾਵੀ ਕਟੌਫ ਮਾਡਲ ਦੇ ਅਧਿਕਤਮ ਯੂਡੇਨ ਸੂਚਕਾਂਕ (ਸੰਵੇਦਨਸ਼ੀਲਤਾ + ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾ - 1) ਦੇ ਅਧਾਰ ਤੇ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।ਥ੍ਰੈਸ਼ਹੋਲਡ ਤੋਂ ਘੱਟ ਜਾਂ ਵੱਧ ਮੁੱਲਾਂ ਵਾਲੇ ਨਮੂਨਿਆਂ ਨੂੰ ਕ੍ਰਮਵਾਰ ਸੁਭਾਵਕ ਨੋਡਿਊਲ ਅਤੇ ਫੇਫੜਿਆਂ ਦੇ ਐਡੀਨੋਕਾਰਸੀਨੋਮਾ ਵਜੋਂ ਭਵਿੱਖਬਾਣੀ ਕੀਤੀ ਜਾਵੇਗੀ।
A549 ਸੈੱਲ (#CCL-185, ਅਮਰੀਕਨ ਟਾਈਪ ਕਲਚਰ ਕਲੈਕਸ਼ਨ) 10% FBS ਵਾਲੇ F-12K ਮਾਧਿਅਮ ਵਿੱਚ ਉਗਾਏ ਗਏ ਸਨ।ਲੈਂਟੀਵਾਇਰਲ ਵੈਕਟਰ pLKO.1-puro ਵਿੱਚ SLC7A5 ਨੂੰ ਨਿਸ਼ਾਨਾ ਬਣਾਉਣ ਵਾਲੇ ਛੋਟੇ ਹੇਅਰਪਿਨ RNA (shRNA) ਕ੍ਰਮ ਅਤੇ ਇੱਕ ਗੈਰ-ਟਾਰਗੇਟਿੰਗ ਕੰਟਰੋਲ (NC) ਸ਼ਾਮਲ ਕੀਤੇ ਗਏ ਸਨ।shSLC7A5 ਦੇ ਐਂਟੀਸੈਂਸ ਕ੍ਰਮ ਇਸ ਪ੍ਰਕਾਰ ਹਨ: Sh1 (5′-GGAGAAAACCTGATGAACAGTT-3′), Sh2 (5′-GCCGTGGACTTCGGGAACTAT-3′)।SLC7A5 (#5347) ਅਤੇ ਟਿਊਬਲਿਨ (#2148) ਲਈ ਐਂਟੀਬਾਡੀਜ਼ ਸੈੱਲ ਸਿਗਨਲਿੰਗ ਤਕਨਾਲੋਜੀ ਤੋਂ ਖਰੀਦੇ ਗਏ ਸਨ।SLC7A5 ਅਤੇ ਟਿਊਬਲਿਨ ਲਈ ਐਂਟੀਬਾਡੀਜ਼ ਪੱਛਮੀ ਬਲੌਟ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਲਈ 1:1000 ਦੇ ਪਤਲੇ ਹੋਣ 'ਤੇ ਵਰਤੇ ਗਏ ਸਨ।
Seahorse XF Glycolytic Stress Test Extracellular acidification (ECAR) ਪੱਧਰਾਂ ਨੂੰ ਮਾਪਦਾ ਹੈ।ਪਰਖ ਵਿੱਚ, ECAR ਦੁਆਰਾ ਮਾਪਿਆ ਗਿਆ ਸੈਲੂਲਰ ਗਲਾਈਕੋਲੀਟਿਕ ਸਮਰੱਥਾ ਦੀ ਜਾਂਚ ਕਰਨ ਲਈ ਕ੍ਰਮਵਾਰ ਗਲੂਕੋਜ਼, ਓਲੀਗੋਮਾਈਸਿਨ ਏ, ਅਤੇ 2-ਡੀਜੀ ਦਾ ਪ੍ਰਬੰਧ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।
ਗੈਰ-ਟਾਰਗੇਟਿੰਗ ਕੰਟਰੋਲ (NC) ਅਤੇ shSLC7A5 (Sh1, Sh2) ਨਾਲ ਤਬਦੀਲ ਕੀਤੇ A549 ਸੈੱਲਾਂ ਨੂੰ 10 ਸੈਂਟੀਮੀਟਰ ਵਿਆਸ ਵਾਲੇ ਪਕਵਾਨਾਂ ਵਿੱਚ ਰਾਤੋ ਰਾਤ ਪਲੇਟ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।ਸੈੱਲ ਮੈਟਾਬੋਲਾਈਟਾਂ ਨੂੰ 1 ਮਿਲੀਲੀਟਰ ਆਈਸ-ਕੋਲਡ 80% ਜਲਮਈ ਮੀਥੇਨੌਲ ਨਾਲ ਕੱਢਿਆ ਗਿਆ ਸੀ।ਮੀਥੇਨੌਲ ਘੋਲ ਵਿੱਚ ਸੈੱਲਾਂ ਨੂੰ ਖੁਰਚਿਆ ਗਿਆ, ਇੱਕ ਨਵੀਂ ਟਿਊਬ ਵਿੱਚ ਇਕੱਠਾ ਕੀਤਾ ਗਿਆ, ਅਤੇ 15,000 × g 'ਤੇ 4°C 'ਤੇ 15 ਮਿੰਟ ਲਈ ਸੈਂਟਰਿਫਿਊਜ ਕੀਤਾ ਗਿਆ।800 µl ਸੁਪਰਨੇਟੈਂਟ ਇਕੱਠਾ ਕਰੋ ਅਤੇ ਹਾਈ-ਸਪੀਡ ਵੈਕਿਊਮ ਕੰਸੈਂਟਰੇਟਰ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਸੁੱਕੋ।ਉੱਪਰ ਦੱਸੇ ਅਨੁਸਾਰ LC-MS/MS ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੇ ਹੋਏ ਸੁੱਕੀਆਂ ਮੈਟਾਬੋਲਾਈਟ ਗੋਲੀਆਂ ਦਾ ਟ੍ਰਿਪਟੋਫਨ ਪੱਧਰਾਂ ਲਈ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।A549 ਸੈੱਲਾਂ (NC ਅਤੇ shSLC7A5) ਵਿੱਚ ਸੈਲੂਲਰ NAD(H) ਪੱਧਰਾਂ ਨੂੰ ਨਿਰਮਾਤਾ ਦੀਆਂ ਹਦਾਇਤਾਂ ਦੇ ਅਨੁਸਾਰ ਇੱਕ ਮਾਤਰਾਤਮਕ NAD+/NADH ਕਲੋਰਮੈਟ੍ਰਿਕ ਕਿੱਟ (#K337, ਬਾਇਓਵਿਜ਼ਨ) ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਮਾਪਿਆ ਗਿਆ ਸੀ।ਮੈਟਾਬੋਲਾਈਟਾਂ ਦੀ ਮਾਤਰਾ ਨੂੰ ਆਮ ਬਣਾਉਣ ਲਈ ਹਰੇਕ ਨਮੂਨੇ ਲਈ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਦੇ ਪੱਧਰ ਨੂੰ ਮਾਪਿਆ ਗਿਆ ਸੀ।
ਨਮੂਨੇ ਦੇ ਆਕਾਰ ਨੂੰ ਮੁਢਲੇ ਤੌਰ 'ਤੇ ਨਿਰਧਾਰਤ ਕਰਨ ਲਈ ਕੋਈ ਅੰਕੜਾ ਵਿਧੀਆਂ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਨਹੀਂ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ।ਬਾਇਓਮਾਰਕਰ ਖੋਜ 15,18 ਦੇ ਉਦੇਸ਼ ਨਾਲ ਪਿਛਲੇ ਮੈਟਾਬੋਲੋਮਿਕਸ ਅਧਿਐਨਾਂ ਨੂੰ ਆਕਾਰ ਨਿਰਧਾਰਨ ਲਈ ਮਾਪਦੰਡ ਮੰਨਿਆ ਗਿਆ ਹੈ, ਅਤੇ ਇਹਨਾਂ ਰਿਪੋਰਟਾਂ ਦੇ ਮੁਕਾਬਲੇ, ਸਾਡਾ ਨਮੂਨਾ ਕਾਫ਼ੀ ਸੀ।ਕਿਸੇ ਵੀ ਨਮੂਨੇ ਨੂੰ ਅਧਿਐਨ ਸਮੂਹ ਤੋਂ ਬਾਹਰ ਨਹੀਂ ਰੱਖਿਆ ਗਿਆ ਸੀ।ਸੀਰਮ ਦੇ ਨਮੂਨੇ ਬੇਤਰਤੀਬੇ ਇੱਕ ਖੋਜ ਸਮੂਹ (306 ਕੇਸ, 74.6%) ਅਤੇ ਇੱਕ ਅੰਦਰੂਨੀ ਪ੍ਰਮਾਣਿਕਤਾ ਸਮੂਹ (104 ਕੇਸ, 25.4%) ਨੂੰ ਅਣ-ਨਿਸ਼ਾਨਾਤਮਕ ਮੈਟਾਬੋਲੋਮਿਕਸ ਅਧਿਐਨਾਂ ਲਈ ਨਿਰਧਾਰਤ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।ਅਸੀਂ ਨਿਸ਼ਾਨਾ ਮੈਟਾਬੋਲੋਮਿਕਸ ਅਧਿਐਨਾਂ ਲਈ ਖੋਜ ਸੈੱਟ ਤੋਂ ਹਰੇਕ ਸਮੂਹ ਤੋਂ ਬੇਤਰਤੀਬੇ 70 ਕੇਸਾਂ ਨੂੰ ਵੀ ਚੁਣਿਆ ਹੈ।ਜਾਂਚਕਰਤਾਵਾਂ ਨੂੰ LC-MS ਡੇਟਾ ਇਕੱਠਾ ਕਰਨ ਅਤੇ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਦੇ ਦੌਰਾਨ ਸਮੂਹ ਅਸਾਈਨਮੈਂਟ ਲਈ ਅੰਨ੍ਹਾ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।ਮੈਟਾਬੋਲੋਮਿਕਸ ਡੇਟਾ ਅਤੇ ਸੈੱਲ ਪ੍ਰਯੋਗਾਂ ਦੇ ਅੰਕੜਾ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣਾਂ ਨੂੰ ਸੰਬੰਧਿਤ ਨਤੀਜਿਆਂ, ਚਿੱਤਰ ਦੰਤਕਥਾਵਾਂ, ਅਤੇ ਵਿਧੀਆਂ ਦੇ ਭਾਗਾਂ ਵਿੱਚ ਵਰਣਨ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਹੈ।ਸੈਲੂਲਰ ਟ੍ਰਿਪਟੋਫੈਨ, ਐਨਏਡੀਟੀ, ਅਤੇ ਗਲਾਈਕੋਲੀਟਿਕ ਗਤੀਵਿਧੀ ਦੀ ਮਾਤਰਾ ਤਿੰਨ ਵਾਰ ਸੁਤੰਤਰ ਤੌਰ 'ਤੇ ਇੱਕੋ ਜਿਹੇ ਨਤੀਜਿਆਂ ਨਾਲ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ।
ਅਧਿਐਨ ਡਿਜ਼ਾਈਨ ਬਾਰੇ ਵਧੇਰੇ ਜਾਣਕਾਰੀ ਲਈ, ਇਸ ਲੇਖ ਨਾਲ ਸੰਬੰਧਿਤ ਕੁਦਰਤੀ ਪੋਰਟਫੋਲੀਓ ਰਿਪੋਰਟ ਐਬਸਟਰੈਕਟ ਦੇਖੋ।
ਐਕਸਟਰੈਕਟ ਕੀਤੀਆਂ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾਵਾਂ ਦਾ ਕੱਚਾ ਐਮਐਸ ਡੇਟਾ ਅਤੇ ਸੰਦਰਭ ਸੀਰਮ ਦਾ ਸਧਾਰਣ ਐਮਐਸ ਡੇਟਾ ਕ੍ਰਮਵਾਰ ਸਪਲੀਮੈਂਟਰੀ ਡੇਟਾ 1 ਅਤੇ ਸਪਲੀਮੈਂਟਰੀ ਡੇਟਾ 2 ਵਿੱਚ ਦਿਖਾਇਆ ਗਿਆ ਹੈ।ਵਿਭਿੰਨ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾਵਾਂ ਲਈ ਪੀਕ ਐਨੋਟੇਸ਼ਨਾਂ ਨੂੰ ਸਪਲੀਮੈਂਟਰੀ ਡੇਟਾ 3 ਵਿੱਚ ਪੇਸ਼ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਹੈ। LUAD TCGA ਡੇਟਾਸੈਟ ਨੂੰ https://portal.gdc.cancer.gov/ ਤੋਂ ਡਾਊਨਲੋਡ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।ਗ੍ਰਾਫ ਨੂੰ ਪਲਾਟ ਕਰਨ ਲਈ ਇਨਪੁਟ ਡੇਟਾ ਸਰੋਤ ਡੇਟਾ ਵਿੱਚ ਪ੍ਰਦਾਨ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਹੈ।ਇਸ ਲੇਖ ਲਈ ਸਰੋਤ ਡੇਟਾ ਪ੍ਰਦਾਨ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਹੈ।
ਨੈਸ਼ਨਲ ਲੰਗ ਸਕ੍ਰੀਨਿੰਗ ਸਟੱਡੀ ਗਰੁੱਪ, ਆਦਿ। ਘੱਟ-ਡੋਜ਼ ਕੰਪਿਊਟਿਡ ਟੋਮੋਗ੍ਰਾਫੀ ਨਾਲ ਫੇਫੜਿਆਂ ਦੇ ਕੈਂਸਰ ਦੀ ਮੌਤ ਦਰ ਨੂੰ ਘਟਾਉਣਾ।ਉੱਤਰੀ ਇੰਗਲੈਂਡ.ਜੇ. ਮੈਡ.365, 395–409 (2011)।
Kramer, BS, Berg, KD, Aberle, DR ਅਤੇ ਪੈਗੰਬਰ, ਪੀਸੀ ਫੇਫੜੇ ਦੇ ਕੈਂਸਰ ਸਕ੍ਰੀਨਿੰਗ ਘੱਟ-ਡੋਜ਼ ਹੈਲੀਕਲ ਸੀਟੀ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੇ ਹੋਏ: ਨੈਸ਼ਨਲ ਲੰਗ ਸਕ੍ਰੀਨਿੰਗ ਸਟੱਡੀ (NLST) ਦੇ ਨਤੀਜੇ।ਜੇ. ਮੈਡ.ਸਕ੍ਰੀਨ 18, 109–111 (2011)।
De Koning, HJ, et al.ਇੱਕ ਬੇਤਰਤੀਬ ਅਜ਼ਮਾਇਸ਼ ਵਿੱਚ ਵੋਲਯੂਮੈਟ੍ਰਿਕ ਸੀਟੀ ਸਕ੍ਰੀਨਿੰਗ ਨਾਲ ਫੇਫੜਿਆਂ ਦੇ ਕੈਂਸਰ ਦੀ ਮੌਤ ਦਰ ਨੂੰ ਘਟਾਉਣਾ।ਉੱਤਰੀ ਇੰਗਲੈਂਡ.ਜੇ. ਮੈਡ.382, 503–513 (2020)।